[發明專利]包含FYN激酶的修飾的SH3結構域的特異性的且高親和力的結合蛋白

無效

• 申請號: 201310010977.7
• 申請日: 2007-08-20
• 公開（公告）號: CN103087172A
• 公開（公告）日: 2013-05-08
• 發明（設計）人: D.格拉布洛夫斯基;D.內里
• 申請（專利權）人: 瑞士聯邦蘇黎世技術大學
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C07K19/00;C12N15/12;C12N15/62;C12N15/63;A61K38/17;A61K47/48;A61P35/00;G01N33/68
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 權陸軍

1.重組結合蛋白，其包含FYN激酶的Src同源性3結構域(SH3)的至少一種衍生物，其中

(a)在src環中或位于src環附近最高達2個氨基酸的至少一個氨基酸，和/或

(b)在RT環中或位于RT環附近最高達2個氨基酸的至少一個氨基酸，

被置換、缺失或添加，其中所述SH3結構域衍生物的氨基酸序列與SEQ?ID?NO：1的氨基酸序列具有至少70、優選至少80、更優選至少90和最優選至少95％序列同一性，

優選地條件是，該重組結合蛋白不包含SEQ?ID?NO：2的氨基酸序列，

且優選地條件是，所述重組蛋白不是在自然界中存在的含有天然SH3結構域的蛋白。

2.根據權利要求1的結合蛋白，其中所述SH3結構域衍生物在src和RT環外與FYN激酶的Src同源性3結構域(SH3)具有至少85、優選至少90、更優選至少95、最優選至少98至100％同一性。

3.根據權利要求1或2的結合蛋白，其中

(a)在src環中的至少一個氨基酸和

(b)在RT環中的至少一個氨基酸，

被置換、缺失或添加。

4.根據權利要求1-3中任一項的結合蛋白，其包含SH3結構域的至少兩種衍生物，優選二價結合蛋白。

5.根據權利要求1-4中任一項的結合蛋白，其包含在SH3結構域衍生物的位置37和/或50的一個或優選兩個改變的殘基，優選兩個疏水的改變的殘基，更優選Trp37和/或Tyr50，Trp37和Tyr50是最優選的。

6.根據權利要求1-5中任一項的結合蛋白，其對靶具有10^-7至10^-12M、優選10^-8至10^-12M的特定的結合親和力，優選治療上和/或診斷上有關的靶，更優選包含PxxP基序的基于氨基酸的靶。

7.根據權利要求1-6中任一項的結合蛋白，其對癌胚纖連蛋白的胞外域(ED-B)具有10^-7至10^-2M、優選10^-8至10^-12M的特定的結合親和力。

8.根據權利要求7的結合蛋白，其具有一個或多個、優選2個在SH3結構域衍生物的位置37和/或50處的改變的、優選疏水的殘基，更優選Trp37和/或Tyr50，且最優選Trp37和Tyr50。

9.根據權利要求1-8中任一項的結合蛋白，其包含SEQ?ID?NO：3的氨基酸序列。

10.根據權利要求1-9中任一項的結合蛋白，其中所述結合蛋白對蛋白或小有機化合物具有結合特異性。

11.融合蛋白，其包含與藥學上和/或診斷上的活性組分相融合的根據權利要求1至10中任一項的結合蛋白。

12.根據權利要求11的融合蛋白，其中所述組分是細胞因子，優選選自下述的細胞因子：IL-2、IL-12、TNF-α、IFN?α、IFN?β、IFNγ、IL-10、IL-15、IL-24、GM-CSF、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-9、IL-11、IL-13、LIF、CD80、B70、TNF?β、LT-β、CD-40配體、Fas-配體、TGF-β、IL-1α和IL-1β。

13.根據權利要求11的融合蛋白，其中所述組分是毒性化合物，優選小有機化合物或多肽，優選選自下述的毒性化合物：加利車霉素、新抑癌蛋白、埃斯波霉素、達內霉素、可達菌素、maduropeptin、阿霉素、柔紅霉素、auristatin、蓖麻毒蛋白-A鏈、蒴蓮根毒素、截短的假單胞菌外毒素A、白喉毒素和重組多花白樹毒蛋白。