[發明專利]一種同時檢測止咳寶片中四種有效成分含量的方法

有效

• 申請號: 201310006901.7
• 申請日: 2013-01-08
• 公開（公告）號: CN103048409A
• 公開（公告）日: 2013-04-17
• 發明（設計）人: 許丹青
• 申請（專利權）人: 廣東臺城制藥股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/34
• 代理公司: 廣州新諾專利商標事務所有限公司 44100
• 代理人: 華輝

技術領域

本發明涉及一種同時檢測止咳寶片中四種有效成分含量的方法，尤其涉及一種HPLC法同時檢測止咳寶片中五味子醇甲、白花前胡甲素、白花前胡乙素和紫菀酮含量的方法。

背景技術

止咳寶片中富含多種中藥材，具有解表散寒、宣肺除痰，益肺氣養肺陰的功效，起到理肺祛痰和止咳平喘的功能。“止咳寶片秘方”入選嶺南中藥文化遺產保護名錄。

止咳寶片現行標準收載于《中國藥典》2010年版一部，其鑒別標準中收載了1個理化鑒別和3個薄層鑒別，而止咳寶片處方中有14味藥。通過研究發現多種藥味的薄層色譜之間均存在陰性干擾，尚無有效分離方法進行鑒別其有效成分，導致現有的質量控制方法未能有效實現產品質量的控制。且現有的檢測方法存在實驗步驟繁瑣，實驗條件不好控制等缺點，且方法的重復性和穩定性也不夠理想。

為了更加有效控制本品質量，通過對處方中藥味成份研究，應用現代高效液相色譜技術，本發明提供一種采用梯度洗脫、變化檢測波長的含量測定方法，其能定性定量的同時測定止咳寶片中五味子醇甲、白花前胡甲素、白花前胡乙素和紫菀酮的含量，方法簡便而快捷，有效提高止咳寶片的質量控制水平，相對現有檢測方法具有技術領先水平。

發明內容

本發明為了彌補現有技術的不足，提供一種同時檢測止咳寶片中四種有效成分含量的方法，該方法應用現代高效液相色譜技術，采用梯度洗脫（兩個梯度或三個梯度），同時變化檢測波長，可定性定量的同時檢測止咳寶片中五味子醇甲、白花前胡甲素、白花前胡乙素和紫菀酮的含量，方法簡便而快捷，而且專屬性強，可有效提高止咳寶片的質量控制水平。

為了實現本發明的目的，所提供的技術方案如下：

一種同時檢測止咳寶片中四種有效成分含量的方法，所述四種有效成分分別是五味子醇甲、白花前胡甲素、白花前胡乙素和紫菀酮，所述方法包括如下步驟：

（1）確定色譜條件：采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為色譜柱的填充劑，采用由乙腈為流動相A、水為流動相B組成的洗脫液進行梯度洗脫，理論板數按五味子醇甲峰計算不低于5000，梯度洗脫的程序及流動相A、B的體積百分比如下：

梯度1---0~20min，流動相A：B=40~65%：60~35%，A+B=100%，流速為1.0ml/min，檢測波長為245~255nm；梯度1為等度洗脫；（五味子醇甲在0-20min內出峰）

梯度2----20~35min，流動相A：B=〔(40~65%)→(90~100%)〕：〔(60~35%)→(10~0%)〕，A+B=100%，流速為1.0ml/min，檢測波長為220~235nm；梯度2為流動相A、B的體積百分比逐漸變化的梯度洗脫，其中流動相A、B分別由40~65%和60~35%逐漸變化到90~100%和10~0%；（20~35min內白花前胡甲素、白花前胡乙素先后出峰）

梯度3----流動相A：B=90~100%：10~0%，A+B=100%，流速為1.0~1.3ml/min，檢測波長為195~205nm；梯度3為等度洗脫；待紫菀酮出峰后，繼續洗脫至無雜質峰即可。

（2）制備對照品溶液；優選的對照品溶液制備方法是：精密稱取五味子醇甲、白花前胡甲素、白花前胡乙素和紫菀酮對照品，用甲醇溶解并配制成對照品溶液，使每1ml對照品溶液中含有3-7μg五味子醇甲、60-75μg白花前胡甲素、14-20μg白花前胡乙素、5-9μg紫菀酮。采用這一濃度范圍的對照品溶液，有助于準確測定供試品中四種有效成分的含量。

（3）制備供試品溶液；優選的供試品溶液制備方法是：取止咳寶片供試品，除去包衣后研成細粉，用甲醇溶解并配制成0.04或0.08g/ml的供試品溶液。優選為0.08g/ml。

（4）測定：分別精密量取適量（例如10μl）對照品溶液和供試品溶液注入液相色譜儀，記錄色譜圖，并按外標法以峰面積計算，即得檢測結果。

一種同時檢測止咳寶片中四種有效成分含量的方法，所述四種有效成分分別是五味子醇甲、白花前胡甲素、白花前胡乙素和紫菀酮，所述方法包括如下步驟：

（1）確定色譜條件：采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為色譜柱的填充劑，采用由乙腈為流動相A、水為流動相B組成的洗脫液進行梯度洗脫，理論板數按五味子醇甲峰計算不低于5000，梯度洗脫的程序及流動相A、B的體積百分比如下：