[發明專利]一種同時檢測止咳寶片中四種有效成分含量的方法

有效

• 申請號: 201310006901.7
• 申請日: 2013-01-08
• 公開（公告）號: CN103048409A
• 公開（公告）日: 2013-04-17
• 發明（設計）人: 許丹青
• 申請（專利權）人: 廣東臺城制藥股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/34
• 代理公司: 廣州新諾專利商標事務所有限公司 44100
• 代理人: 華輝

1.一種同時檢測止咳寶片中四種有效成分含量的方法，所述四種有效成分分別是五味子醇甲、白花前胡甲素、白花前胡乙素和紫菀酮，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

（1）確定色譜條件：采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為色譜柱的填充劑，采用由乙腈為流動相A、水為流動相B組成的洗脫液進行梯度洗脫，理論板數按五味子醇甲峰計算不低于5000，梯度洗脫的程序及流動相A、B的體積百分比如下：

梯度1---0~20min，流動相A：B=40~65%：60~35%，A+B=100%，流速為1.0ml/min，檢測波長為245~255nm；

梯度2----20~35min，流動相A：B=〔(40~65%)→(90~100%)〕：〔(60~35%)→(10~0%)〕，A+B=100%，流速為1.0ml/min，檢測波長為220~235nm；

梯度3---流動相A：B=90~100%：10~0%，A+B=100%，流速為1.0~1.3ml/min，檢測波長為195~205nm；

（2）制備對照品溶液；

（3）制備供試品溶液；

（4）測定：分別精密量取適量對照品溶液和供試品溶液注入液相色譜儀，記錄色譜圖，并按外標法以峰面積計算，即得檢測結果。

2.一種同時檢測止咳寶片中四種有效成分含量的方法，所述四種有效成分分別是五味子醇甲、白花前胡甲素、白花前胡乙素和紫菀酮，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

（1）確定色譜條件：采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為色譜柱的填充劑，采用由乙腈為流動相A、水為流動相B組成的洗脫液進行梯度洗脫，理論板數按五味子醇甲峰計算不低于5000，梯度洗脫的程序及流動相A、B的體積百分比如下：

梯度1-----0~35min，流動相A：B=〔(40~50%)→(90~100%)〕：〔(60~50%)→(10~0%)〕，A+B=100%，流速為1.0~1.2ml/min，檢測波長為220~265nm；

梯度2-----流動相A：B=90~100%：10~0%，A+B=100%，流速為1.0~1.3ml/min，檢測波長為195~205nm；

（2）制備對照品溶液；

（3）制備供試品溶液；

（4）測定：分別精密量取適量對照品溶液和供試品溶液注入液相色譜儀，記錄色譜圖，并按外標法以峰面積計算，即得檢測結果。

3.根據權利要求1或2所述的同時檢測止咳寶片中四種有效成分含量的方法，其特征在于，制備供試品溶液時，將供試品細粉置于具塞錐形瓶中，加入甲醇，稱定總重量，于40℃溫浸1小時后，超聲10min，然后放至室溫，并再稱定總重量，用甲醇補足損失的重量，搖勻并過濾，取續濾液作為供試品溶液。

4.根據權利要求1或2所述的同時檢測止咳寶片中四種有效成分含量的方法，其特征在于，制備對照品溶液時，精密稱取五味子醇甲、白花前胡甲素、白花前胡乙素和紫菀酮對照品，用甲醇溶解并配制成對照品溶液，使每1ml對照品溶液中含有3-7μg五味子醇甲、60-75μg白花前胡甲素、14-20μg白花前胡乙素、5-9μg紫菀酮。

5.根據權利要求4所述的同時檢測止咳寶片中四種有效成分含量的方法，其特征在于，制備對照品溶液時，每1ml對照品溶液中含有5μg五味子醇甲、70μg白花前胡甲素、18μg白花前胡乙素、7μg紫菀酮。

6.根據權利要求1或2所述的同時檢測止咳寶片中四種有效成分含量的方法，其特征在于，當連續進樣檢測時，追加洗脫時長為5分鐘的洗脫梯度，該追加的洗脫梯度將流動相A、B的體積百分比變換為梯度1洗脫時的流動相A、B體積百分比的起始比例，并將檢測波長變換到梯度1的起始檢測波長。

7.根據權利要求2所述的同時檢測止咳寶片中四種有效成分含量的方法，其特征在于，步驟（1）中梯度洗脫的程序及流動相A、B的體積百分比如下：

梯度1----0~35min，流動相A：B=40%→96%：60%→4%，A+B=100%，流速為1.0ml/min，檢測波長為250nm，當洗脫15分鐘時波長變換為228nm，

梯度2----流動相A：B=96%：4%，A+B=100%，流速為1.2ml/min，檢測波長為200nm。

8.根據權利要求2所述的同時檢測止咳寶片中四種有效成分含量的方法，其特征在于，所述步驟（1）中梯度洗脫的程序及流動相A、B的體積百分比如下：

梯度1----0~30min，流動相A：B=50%→100%：50%→0%，A+B=100%，流速為1.0ml/min，檢測波長為228nm，

梯度2----流動相A：B=100%：0%，A+B=100%，流速為1.2ml/min，檢測波長為200nm。