[發明專利]一種石蠟細胞芯片接種方法

有效

• 申請號: 201310002236.4
• 申請日: 2013-01-04
• 公開（公告）號: CN103091151A
• 公開（公告）日: 2013-05-08
• 發明（設計）人: 侯英勇;石園;胡沁;何德明;蔣冬先;宿杰阿克蘇;曾海英;譚云山
• 申請（專利權）人: 復旦大學附屬中山醫院
• 主分類號: G01N1/36
• 分類號: G01N1/36
• 代理公司: 上海申匯專利代理有限公司 31001
• 代理人: 翁若瑩;王婧

1.一種石蠟細胞芯片接種方法，其特征在于，具體步驟為：

第一步：將細胞用福爾馬林固定過的腸衣包裹，隨同病理科常規組織處理程序進行處理，至浸蠟的步驟，得到浸好蠟的細胞標本；

第二步：將浸好蠟的細胞標本連同腸衣加熱至融化狀態，打開腸衣，將細胞及液態石蠟刮入EP管，混勻后，塑形成所需形狀的細胞芯片，留存；

第三步：將蠟加熱直至融化狀態，將蠟模制備框放在蠟模板上，將蠟倒入蠟模制備框中聚合，待蠟聚合后，放入-10℃～-20℃冰箱2～10min，取出，撤下蠟模板；

第四步：將所得的蠟模連同蠟模制備框放置于50～70℃孵箱中5～8min，使蠟模略變軟后取出，在蠟模的接種范圍內鉆孔，將第二步所得的細胞芯片種入蠟模相應的孔中；

第五步：將第四步中所得的蠟模放在恒溫孵育箱內聚合，升溫至54～56℃，1～3h后停止加熱，自然冷卻；

第六步：將蠟模和蠟模制備框置入-10℃～-20℃冰箱10～20min，取出后，側敲蠟模制備框，將蠟模與蠟模制備框分離，將所得的蠟模切片后，即得石蠟細胞芯片。

2.如權利要求1所述的石蠟細胞芯片接種方法，其特征在于，所述第二步中的細胞柱的形狀為長方體形、正方體形、管狀或柱狀。

3.如權利要求1所述的石蠟細胞芯片接種方法，其特征在于，所述第三步中的蠟模制備框為耐高溫材料制作，長為30mm～40mm，寬為15mm～30mm，高為10mm～15mm，壁厚為2mm～4mm。

4.如權利要求1所述的石蠟細胞芯片接種方法，其特征在于，所述第三步中的蠟模板為耐高溫材料制作，長為60mm～70mm，寬為30mm～40mm，厚為5mm～10mm，其中央設有一個由四條凹槽圍成的長方形區域，所述的凹槽的寬為2mm～4mm，深為1mm，凹槽可與蠟模框嵌合，長方形區域的長為30mm～40mm，寬為15mm～30mm，長方形區域內設有4～10條橫向凹槽及6～15條縱向凹槽，橫向凹槽和縱向凹槽將長方形區域分隔成24～150凸出的網格，網格長1mm～3mm，寬1mm～3mm，其中橫向第一排網格表面刻有鏡像數字或鏡像字母狀凹陷，縱向第一排第二個網格起刻有鏡像字母或鏡像數字狀凹陷，其余網格表面有一直徑為1mm的圓形凸起。