[發明專利]用于前列腺癌分析的組合物和方法

在審

• 申請號: 201280067510.X
• 申請日: 2012-11-29
• 公開（公告）號: CN104067127A
• 公開（公告）日: 2014-09-24
• 發明（設計）人: S.阿特瓦爾;J-A.杭戈;M.萊克納;E.普恩諾茲;B.魯賓菲爾德;R.維杰
• 申請（專利權）人: 霍夫曼-拉羅奇有限公司
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務所 11105
• 代理人: 張文輝

相關申請

本申請依據35USC119(e)要求2011年11月29日提交的美國臨時專利申請No.61/629,886和2012年9月19日提交的美國臨時專利申請No.61/703,099的優先權，通過提述將其內容完整收入本文。

發明領域

本發明涉及腫瘤學和癌癥診斷領域，更具體地涉及用于前列腺癌篩選，分階段，治療監測的組合物和方法。

發明背景

前列腺癌是男性中最流行的癌癥之一。雖然大多數早期發作的前列腺癌是沒有癥狀且生長緩慢的，但是某些前列腺癌更具攻擊性，疼痛且導致死亡。目前，有兩大類非侵入性篩選測試可用于在男性中檢測前列腺癌。一種是手指直腸檢查(DRE)(其容許醫生通過將戴有手套的手指插入直腸并感受前列腺來檢測前列腺異常)，而另一種是前列腺表面抗原測試(PSA測試)(其測量血液樣品中PSA抗原的水平)。雖然FDA已經批準與DRE一起使用PSA測試來幫助在男性中檢測前列腺癌，但是PSA測試在篩選方面是有爭議的，因為不清楚該測試是否實際地挽救生命。特別地，基于PSA篩選沒有或很小降低前列腺癌死亡率，同時導致引起不必要的疼痛和副作用的治療或測試的發現，美國預防服務工作組最近反對推薦在健康男性中進行PSA篩選(參見例如R.Chou et al,Ann.Intern.Med.,October7,2011E-375；Djulbegovic et al,BMJ2010,341:c4543)。前列腺癌的最確定性診斷是活檢，其中自疑似患者取出的一小塊前列腺針對腫瘤細胞的存在情況進行顯微鏡檢查。顯然，此類規程相當具有侵入性，不太期望用于早期篩選和檢測。

正如在許多其它類型的癌癥中，前列腺癌患者中的主要死亡原因不是原發性腫瘤而是轉移。一些原發性腫瘤細胞自身能脫離初始組織并進入循環。這些細胞稱作循環腫瘤細胞(CTC)。一旦CTC自身播種至身體中的合適部位，它們就可發展成轉移性集落，它們難以檢測且隨著它們進展成繼發性腫瘤能危及生命。試圖檢測CTC。然而，尚未開發出能辨別CTC是否源自前列腺及前列腺癌如何進展的方法。鑒于最近的發現，即PSA篩選未能降低死亡率，仍然存在開發能在前列腺癌的診斷和預后中提供可靠結果的藥劑和方法的重大需要。

發明概述

一方面，本公開文本提供用于在測試受試者中診斷前列腺癌的方法，其包括：a)使上皮起源的癌細胞與特異性結合前列腺特異性標志物的抗體接觸，其中該癌細胞來自取自測試受試者的血液樣品；并b)測定任何癌細胞是否表達前列腺特異性標志物，其中存在表達前列腺特異性標志物的癌細胞指示測試受試者中具有前列腺癌。

在某些實施方案中，該方法進一步包括測定表達前列腺特異性標志物的癌細胞的量，其中此類量指示測試受試者中的前列腺癌的階段。

在某些實施方案中，該方法進一步包括測定癌細胞上前列腺特異性標志物的表達水平。

在某些實施方案中，該方法進一步包括基于癌細胞的前列腺特異性標志物表達水平對癌細胞分等級，并測定每個等級中的癌細胞的百分比。

在某些實施方案中，該方法進一步包括通過將該等級中的癌細胞的百分比乘以基于前列腺特異性標志物的表達水平指派給該等級的獨特等級數為每個等級計算等級得分，并將所有等級得分加和以獲得H得分，其中H得分指示測試受試者中的前列腺癌的階段。

在某些實施方案中，該癌細胞是用包含配體的捕捉組合物自血液樣品鑒定的，該配體特異性結合上皮起源的癌細胞。在某些實施方案中，該配體為特異性結合優先在癌細胞上表達的上皮抗原的抗體。在某些實施方案中，該上皮抗原為上皮細胞粘附分子(EpCAM)。

在某些實施方案中，在自血液樣品分離的細胞級分中富集鑒定的癌細胞。在某些實施方案中，該細胞級分是在磁場下分離的。在某些實施方案中，該捕捉組合物中的配體是與磁性顆粒偶聯的。

在某些實施方案中，該特異性結合前列腺特異性標志物的抗體包含抗STEAP-1抗體。在某些實施方案中，該抗STEAP-1抗體以≤1000nM的KD結合STEAP-1。在某些實施方案中，該抗STEAP-1抗體為鼠單克隆抗體。在某些實施方案中，該抗STEAP-1抗體為15A5，15A5是由具有微生物保藏號PTA-12259的雜交瘤細胞生成的15A5。

在某些實施方案中，該癌細胞是用一種或多種容許檢測上皮起源的癌細胞的試劑鑒定的。在某些實施方案中，該試劑包含特異性結合細胞角蛋白的配體，且其中該配體任選是與第二可檢測標記物綴合的。在某些實施方案中，該試劑進一步包含區分細胞與非細胞成分的染料。在某些實施方案中，該試劑進一步包含特異性結合白細胞標志物的配體。