[發明專利]巖藻糖基化抗體的分離方法

在審

• 申請號: 201280051644.2
• 申請日: 2012-10-16
• 公開（公告）號: CN103890002A
• 公開（公告）日: 2014-06-25
• 發明（設計）人: A·弗萊莫斯-格林德朔貝爾;C·耶格爾;P·松德爾曼;P·烏馬納
• 申請（專利權）人: 羅切格利卡特公司
• 主分類號: C07K1/22
• 分類號: C07K1/22;C07K16/00;C07K14/705
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 陳迎春;黃革生

1.一種用于分離具有不同巖藻糖基化程度的抗體的方法，所述方法包括以下步驟：

a)提供抗體的群，

b)使所述抗體的群與固定在載體上的Fc受體接觸，

c)洗脫非特異性結合于所述Fc受體的所述抗體，和

d)洗脫特異性結合于所述Fc受體的所述抗體。

2.權利要求1的方法，其中所述Fc受體對所述抗體的結合親和力取決于所述抗體的巖藻糖基化程度。

3.權利要求1或2的方法，其中所述Fc受體為Fcγ受體。

4.前述權利要求中任一項的方法，其中所述Fc受體為FcγRIIIa。

5.前述權利要求中任一項的方法，其中所述Fc受體為FcγRIIIa(V158)。

6.前述權利要求中任一項的方法，其中所述抗體為IgG抗體。

7.前述權利要求中任一項的方法，其中所述抗體被糖改造為在它們的Fc區具有與相應的非糖改造抗體相比增加比例的非巖藻糖基化寡糖。

8.前述權利要求中任一項的方法，其中所述抗體的群是純化的。

9.前述權利要求中任一項的方法，其中使用蛋白質A或蛋白質G親和純化所述抗體的群。

10.前述權利要求中任一項的方法，其中所述載體為聚合物基質。

11.前述權利要求中任一項的方法，其中所述載體包含在層析柱中。

12.前述權利要求中任一項的方法，其進一步包括以下步驟：

c1)洗滌所述載體。

13.前述權利要求中任一項的方法，其中步驟c)的洗脫包括在步驟b)中的接觸后，在所述抗體群中保持游離的抗體的分離。

14.前述權利要求中任一項的方法，其中步驟c)中洗脫的所述抗體為完全巖藻糖基化抗體。

15.前述權利要求中任一項的方法，其中步驟d)的所述洗脫包括使所述載體與緩沖液接觸，所述緩沖液中斷抗體與所述Fc受體的結合。

16.權利要求15的方法，其中所述緩沖液的pH值在約3至約5的所述范圍內。

17.前述權利要求中任一項的方法，其中在不同pH值下實施步驟d)的洗脫。

18.權利要求17的方法，其中所述pH值包括4.6和4.2。

19.前述權利要求中任一項的方法，其中步驟d)洗脫的所述抗體為部分巖藻糖基化和/或完全非巖藻糖基化的抗體。

20.前述權利要求中任一項的方法，其中所述方法被用于分析目的。

21.前述權利要求中任一項的方法，其中所述方法被用于制備目的。

22.前述權利要求中任一項的方法，其進一步包括以下步驟：

e)收集步驟c)和/或步驟d)的洗脫的抗體。

23.根據權利要求22所述的方法，其進一步包括以下步驟：

f)使用所述收集的抗體用于實驗或治療目的。

24.Fc受體在用于分離具有不同巖藻糖基化程度的抗體的方法中的用途。

25.固定在載體上的Fc受體，用于分離具有不同巖藻糖基化程度的抗體的方法。

26.如上文所述的發明。