[發(fā)明專利]納米顆粒?肽組合物

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201280049979.0
• 申請日: 2012-09-07
• 公開（公告）號: CN103917249B
• 公開（公告）日: 2016-11-09
• 發(fā)明（設計）人: T·雷德梅徹爾;P·威廉姆斯
• 申請（專利權）人: MIDA科技有限公司
• 主分類號: A61K47/48
• 分類號: A61K47/48;A61P35/00;A61P31/00
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所 11038
• 代理人: 袁泉

發(fā)明領域

本發(fā)明涉及用于細胞內肽遞送的物質和組合物，特別是肽的納米顆粒-介導的遞送。在特定情況下，本發(fā)明涉及表位肽的細胞內遞送，例如，以誘導T細胞應答。可以采用細胞內肽遞送用于治療性和/或預防性處理，特別是腫瘤和/或病原體-介導的疾病，如細菌、病毒或寄生蟲感染。

發(fā)明背景

基于肽的療法如免疫療法的設計與開發(fā)的顯著挑戰(zhàn)，是向細胞內隔室進行肽的細胞內遞送。一個例子是需要將抗原肽遞送至抗原加工機制，從而使得所述肽被呈遞結合至MHC?I類分子并且由此刺激CTL應答。其他例子包括將基于肽的藥物遞送至細胞內藥物靶點。特別地，游離肽通常顯示為被細胞弱攝取。

迄今為止已采用的一種方法是通過施用例如病毒載體的載體將肽遞送至細胞內位置，所述載體包含編碼所選肽的多聚核苷酸，從而使得所述細胞能由所述載體轉染且所述肽由細胞翻譯機制制造。將肽遞送至細胞內位置的策略的進一步例子在Muders?et?al.,2009,Clin?Cancer?Res,Vol.15(12),pp.4095-4103中描述，其中GIPC-PDZ靶向肽被遞送至特定胰腺腫瘤細胞內。所述肽由N-末端豆蔻酰化（myristolation）修飾。

然而，仍然需要肽的細胞內遞送的其他方法和組合物，例如，為了誘導免疫應答或對特定基于肽的藥物的施用。本發(fā)明解決了這些和其它需要。

WO2006/037979描述了包含抗原和佐劑的納米顆粒，及包含所述納米顆粒的免疫原性結構。

發(fā)明概述

廣義而言，本發(fā)明涉及肽的基于納米顆粒的細胞內遞送。本發(fā)明人已經發(fā)現(xiàn)本文所描述的本發(fā)明的納米顆粒能夠被細胞攝取并由此將所選肽遞送至細胞內靶點中，所述納米顆粒具有包括經由特殊接頭共價附著至納米顆粒核的所選肽的冠。如本文所描述，所述所選肽可以隨后從納米顆粒中釋放，例如通過特定的裂解過程，從而釋放所述所選肽用于與細胞內靶點相互作用。這方面的一個例子是經由MHCⅠ類分子將表位肽遞送至APC用于加工和呈遞，從而引起CTL應答。

相應地，在第一個方面本發(fā)明提供了一種納米顆粒，其包含：

（i）包含金屬和/或半導體原子的核；

（ii）包含共價連接至所述核的多個配體的冠，其中所述多個中的至少第一配體包含經由第一接頭共價連接至所述核的碳水化合物部分或其中所述多個的所述第一配體包含谷胱甘肽，并且其中所述多個中的至少第二配體包含經由第二接頭共價連接至所述核的所選肽，所述第二接頭包含：

肽部分和非肽部分，其中所述第二接頭的所述肽部分包含序列X₁X₂Z₁，其中：

X₁為選自A和G的氨基酸；

X₂為選自A和G的氨基酸；和

Z₁為選自Y和F的氨基酸。

在依照本發(fā)明的在一些情況下，第二接頭的非肽部分包含C2-C15烷基和/或C2-C15二醇，例如乙硫酯基團或硫丙基團。

在依照本發(fā)明的在一些情況下，第一配體和/或所述第二配體經由含硫基團、含氨基的基團、含磷酸基團或含氧基團共價連接至核。

在依照本發(fā)明的在一些情況下，所述第二接頭的所述肽部分包含選自以下的氨基酸序列或由選自以下的氨基酸序列組成：

(i)AAY；和

(ii)FLAAY(SEQ?ID?NO:1)。

在特定優(yōu)選的情況下，所述第二接頭選自：

(i)HS-(CH₂)₂-CONH-AAY；

(ii)HS-(CH₂)₂-CONH-FLAAY；

(iii)HS-(CH₂)₃-CONH-AAY；

(iv)HS-(CH₂)₃-CONH-FLAAY；

(v)HS-(CH₂)₁₀-(CH₂OCH₂)₇-CONH-AAY；和

(vi)HS-(CH₂)₁₀-(CH₂OCH₂)₇-CONH-FLAAY，

其中所述第二接頭經由所述接頭的非肽部分的硫醇基團共價連接至所述核。