[發明專利]色譜純化方法和設備

有效

• 申請號: 201280049023.0
• 申請日: 2012-09-15
• 公開（公告）號: CN103842045A
• 公開（公告）日: 2014-06-04
• 發明（設計）人: R.斯庫達斯
• 申請（專利權）人: 默克專利股份公司
• 主分類號: B01D15/18
• 分類號: B01D15/18;B01D15/36;B01D15/38;G01N30/46
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 童春媛;萬雪松

1.?一種設備，其包含

-?兩個分離單元A1和A2以及分離單元B，分離單元A1和A2兩者具有相同的色譜基質，分離單元B具有不同于分離單元A1和A2的色譜基質的色譜基質，所有的分離單元都具有流體入口和流體出口，由此，至少在分離單元A1的流體出口與分離單元B的流體入口之間有流體連接和在分離單元A2的流體出口與分離單元B的流體入口之間有流體連接，

-?在分離單元A1和A2與分離單元B之間的流體連接中的至少一個閥，其允許在分離單元A1的出口與分離單元B的流體入口之間的流體連通以及分離單元A2的出口與分離單元B的流體入口之間的流體連通之間切換，

-?至少兩個緩沖劑儲液器和至少兩個泵，

-?包含樣品溶液的儲液器，其與分離單元A1和A2的入口流體連接。

2.?權利要求1的設備，其特征在于分離單元A1和A2具有親和色譜基質、陽離子交換色譜基質、混合模式陽離子交換色譜基質或陰離子交換色譜基質。

3.?權利要求1或2的設備，其特征在于分離單元B具有陽離子交換色譜基質、混合模式陰離子交換色譜基質或陰離子交換色譜基質。

4.?權利要求1-3中一或多項的設備，其特征在于分離單元A1和A2具有親和色譜基質，分離單元B具有陽離子交換色譜基質、混合模式陽離子交換色譜基質或陰離子交換色譜基質。

5.?權利要求1-3中一或多項的設備，其特征在于分離單元A1和A2具有陽離子交換色譜基質或混合模式陽離子交換色譜基質，分離單元B具有陰離子交換色譜基質或混合模式陰離子交換色譜基質。

6.?權利要求1-5中一或多項的設備，其特征在于該設備還包含在分離單元A1的流體出口與分離單元A2的流體入口之間的連接線，和在分離單元A2的流體出口與分離單元A1的流體入口之間的連接線。

7.?權利要求1-6中一或多項的設備，其特征在于該設備包含在分離單元A1和A2的出口與分離單元B的流體入口之間的連接線中的流體入口。

8.?權利要求1-7中一或多項的設備，其特征在于該設備包含具有病毒滅活緩沖劑的附加的儲液器，其至少與三個分離單元中一個的入口流體連接。

9.?權利要求1-8中一或多項的設備，其特征在于該設備包含具有用于原位清洗的緩沖劑的至少一個附加的儲液器，其至少與三個分離單元中一個的入口流體連接。

10.?一種采用權利要求1-9中一或多項的設備從樣品中的一或多種雜質純化靶分子的方法，該方法包括以下步驟：

-?交替將樣品裝載于分離單元A1和A2上，使得當樣品裝載于其中樣品處于能使靶分子與分離單元A1結合的第一pH和電導率下的分離單元A1上時，分離單元A2在至少部分該時間內與分離單元B流體連通，使得裝載于分離單元A2上的靶分子被洗脫至分離單元B上，且分離單元A2?再平衡，并且當樣品裝載于其中樣品處于能使靶分子與分離單元A2結合的第一pH和電導率下的分離單元A2上時，分離單元A1在至少部分該時間內與分離單元B流體連通，使得裝載于分離單元A1上的靶分子被洗脫至分離單元B上，且分離單元A1再平衡，

-?從分離單元B的流體出口中回收所述靶分子。

11.?權利要求10的方法，其特征在于所述靶分子是抗體。

12.?權利要求10-11中一或多項的方法，其特征在于當將樣品裝載于分離單元A1上時，分離單元A1的流體出口在至少部分該時間內與分離單元A2的流體入口流體連通，使得能夠將開始瀝濾的靶分子從分離柱A1中捕獲以結合至分離柱A2?上，并且當將樣品裝載于分離單元A2上時，分離單元A2的流體出口在至少部分該時間內與分離單元A1的流體入口流體連通，使得能夠將開始瀝濾的靶分子從分離柱A2中捕獲以結合至分離柱A1?上。

13.?權利要求10-12中一或多項的方法，其特征在于，將所述靶分子裝載于分離單元A1之后，將病毒滅活緩沖劑泵送通過分離單元A1，和將所述靶分子裝載于分離單元A2之后，將病毒滅活緩沖劑泵送通過分離單元A2。