[發(fā)明專利]非B亞型GAG蛋白在慢病毒包裝中的應用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201280046712.6 | 申請日: | 2012-09-25 |
| 公開(公告)號: | CN104039968B | 公開(公告)日: | 2018-10-26 |
| 發(fā)明(設計)人: | T-L·特蘭;P·沙紐;C·伯奇 | 申請(專利權)人: | 賽拉福柯蒂斯公司;巴斯德研究院 |
| 主分類號: | C12N15/867 | 分類號: | C12N15/867;C07K14/16 |
| 代理公司: | 上海專利商標事務所有限公司 31100 | 代理人: | 楊昀 |
| 地址: | 法國維*** | 國省代碼: | 法國;FR |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | gag 蛋白 病毒 包裝 中的 應用 | ||
1.一種復制缺陷型慢病毒包裝載體,所述載體缺乏Ψ位點且編碼D亞型HIV-1Gag-Pol蛋白;其中,所述HIV-1Gag-Pol蛋白是HIV-1NDK的HIV-1Gag-Pol蛋白,并且由SEQ ID NO:2的氨基酸序列組成。
2.如權利要求1所述的載體,其特征在于,所述載體是包含編碼由SEQ ID NO:2的氨基酸序列組成的D亞型HIV-1Gag-Pol蛋白的核苷酸序列的質粒。
3.一種用于產生包裝載體的方法,所述方法包括:將編碼D亞型HIV-1Gag-Pol蛋白的核苷酸序列插入質粒中受非HIV啟動子控制,以產生所述包裝載體;其中,所述HIV-1Gag-Pol蛋白是HIV-1NDK的HIV-1Gag-Pol蛋白,并且由SEQ ID NO:2的氨基酸序列組成。
4.一種用于產生慢病毒載體顆粒的方法,所述方法包括:向細胞給予編碼D亞型HIV-1Gag-Pol蛋白的包裝載體和慢病毒載體;其中,所述HIV-1Gag-Pol蛋白是HIV-1NDK的HIV-1Gag-Pol蛋白,并且由SEQ ID NO:2的氨基酸序列組成。
5.如權利要求4所述的方法,其特征在于,所述包裝載體和所述慢病毒載體是質粒。
6.如權利要求4所述的方法,其特征在于,所述細胞瞬時表達D亞型HIV-1Gag和Pol蛋白。
7.如權利要求4所述的方法,其特征在于,將所述包裝載體整合進入所述細胞的基因組。
8.如權利要求4所述的方法,其特征在于,所述方法還包括選擇包裝載體,所述包裝載體包裝的慢病毒載體的效價高于編碼B亞型HIV-1Gag-Pol蛋白的相同包裝載體。
9.一種包含權利要求1所述的載體的細胞。
10.如權利要求9所述的細胞,其特征在于,將所述載體整合進入所述細胞的基因組。
11.一種包含D亞型HIV-1Gag和Pol蛋白的慢病毒載體顆粒;其中,所述Gag和Pol蛋白是HIV-1NDK Gag和Pol蛋白,并且是通過表達編碼SEQ ID NO:2的氨基酸序列的核酸序列而產生的Gag和Pol蛋白。
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