[發明專利]作為疫苗的HMGB2基因失活的減毒瘧原蟲

無效

• 申請號: 201280045498.2
• 申請日: 2012-07-19
• 公開（公告）號: CN103842029A
• 公開（公告）日: 2014-06-04
• 發明（設計）人: 凱瑟琳·瓦克羅;西爾維·布里凱;納杜·埃塞尼亞·勞森-赫巴恩;薩拉赫迪內·梅凱里;羅伯特·梅納德
• 申請（專利權）人: 皮埃爾與瑪麗·居里-巴黎第六大學;巴斯德研究院
• 主分類號: A61P33/06
• 分類號: A61P33/06;A61K39/015
• 代理公司: 隆天國際知識產權代理有限公司 72003
• 代理人: 吳小瑛;王芝艷

技術領域

本發明屬于醫藥領域，尤其是防治瘧疾。

背景技術

瘧疾是由瘧原蟲(Plasmodium)屬的真核單細胞寄生蟲引起的傳染病。這類寄生蟲病出現在世界各地，并在發展中國家中導致嚴重的經濟和健康問題。惡性瘧原蟲(P.falciparum)是感染人類的5類瘧原蟲中危害最大的種類。據世界衛生組織(法文縮寫為OMS)，惡性瘧原蟲導致25000至50000萬例急性疾病并且每年導致約100萬例死亡(尤其是小于5歲的兒童和孕婦)。腦型瘧疾是瘧疾的一種嚴重神經性并發癥，這類疾病致死病例中的絕大多數都歸咎于此。即使個體存活了，腦型瘧疾可導致嚴重的神經性副作用，特別是對于幼兒，其免疫系統尚在形成過程之中。腦型瘧疾的發病機制復雜且仍然尚未完全闡明。目前認為，腦型病理可能是在主要器官(脾臟、肺、心臟、腸、腎、肝和腦)的微血管中被寄生的紅細胞的隔離(séquestration)以及同樣在這些器官中促炎細胞因子產生的結果，造成了可導致個體死亡的全身性綜合征和狀態。

防治瘧疾是OMS的主要挑戰之一，但迄今為止，旨在控制這種疾病的所有努力都失敗了。在過去三十年中，盡管OMS的數據似乎是令人鼓舞的，但情況已然惡化，這是因為瘧蚊(anophèles)對殺蟲劑產生抗性并且惡性瘧原蟲對于抗瘧疾藥物(即使是組合使用)產生持續增加的化學抗性。

防治瘧疾由于缺乏行之有效的抗這種疾病的疫苗而遇到困難。開發疫苗的第一次嘗試可追溯到20世紀70年代。自那時以來，出現了越來越多的疫苗試驗，而后者面臨著寄生蟲在其2個連續宿主(人和蚊子)中發育的復雜性，并且還面臨著寄生蟲逃避免疫系統的異常復雜的機制，其涉及相當高的抗原變異。

這種在寄生蟲紅細胞內期的變異使得傳統的利用瘧原蟲蛋白質-肽復合物的預防性免疫變得極其困難。由寄生蟲的蛋白質生產的瘧疾疫苗目前處于臨床試驗的III期(RTS，S?de?GlaxoSmithKline?Biologicals)。然而，來自II期的結果表明，該疫苗僅可減少35%的臨床瘧疾發生，且僅可減少49%的嚴重瘧疾的發生。

獲得有效對抗寄生蟲的紅細胞形式的疫苗無論如何仍然是根除疾病中的主要挑戰，因為這樣的疫苗將既可以減輕癥狀，又可以減少寄生蟲載量和血液中配子體的量，從而減少寄生蟲的傳播。

最近的研究表明，極低劑量的由惡性瘧原蟲3D7寄生的紅細胞與抗瘧疾藥物同時給藥聯合的重復給藥誘導了能夠保護患者以抵抗同源種屬的紅細胞內期的免疫(Pombo等人，2002)。

因此，設想利用遺傳減毒的活寄生蟲(或GAP，“遺傳減毒寄生蟲”)來誘導長期不育的保護。因此，幾種GAP已被公開。然而，大多數的這類GAP經由減毒寄生蟲的子孢子而靶向于肝細胞階段。也已經公開了2個靶向紅細胞內期的GAP：其中嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)(Ting等人，2008)或核苷轉運蛋白1(NT1)(Aly等人，2010)已被失活的嚙齒目動物寄生蟲約氏瘧原蟲(P.yoelii)。已表明，這些GAP所提供的免疫是針對于同源種屬的，但也在較小程度上針對于異源種屬。然而，使用這些遺傳減毒的活寄生蟲的疫苗的療效和無害性仍尚待確認。

因此，現在仍然有必要開發新的策略，以特定地抑制嚴重攻擊的發生，如腦型瘧疾的發生，同時也減少寄生蟲載量和外周血中配子體的量，從而減少該疾病傳播的風險。

發明內容

本發明的目的是提供新的用于預防瘧疾的疫苗組合物，尤其是預防瘧疾如腦型瘧疾的嚴重攻擊的發生。

發明人已經證實，屬于瘧原蟲屬的且其hmgb2基因功能已被失活的活寄生蟲可以用作瘧疾疫苗中的免疫原。實際上，已觀察到，施用這種寄生蟲在宿主中誘導了免疫反應，其可以清除寄生蟲(寄生蟲載量低于用顯微鏡在外周血中檢測的閾值)，并有效地和長期地抵御瘧原蟲的感染，尤其是高致病種屬，且尤其是抵御導致疾病癥狀和傳播的寄生蟲的紅細胞內期。

因此，本發明首先涉及屬于瘧原蟲屬且其hmgb2基因功能已被失活的活寄生蟲，其用于預防瘧疾，尤其是預防具有嚴重神經性并發癥的腦型瘧疾。

優選地，本發明的寄生蟲用于預防哺乳動物的瘧疾或腦型瘧疾，尤其是人類。