[發(fā)明專利]包含CSP-B 5’-SAR因子的動物細(xì)胞表達(dá)載體及利用該載體的重組蛋白質(zhì)的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201280029037.6
• 申請日: 2012-05-21
• 公開（公告）號: CN103797123A
• 公開（公告）日: 2014-05-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 高麗旭;李相瑢;金秀娟;文昇基
• 申請（專利權(quán)）人: 株式會社鐘根堂
• 主分類號: C12N15/85
• 分類號: C12N15/85;C12N5/10;C12N15/12
• 代理公司: 中國國際貿(mào)易促進(jìn)委員會專利商標(biāo)事務(wù)所 11038
• 代理人: 韓威威

1.一種動物細(xì)胞用表達(dá)載體，其特征在于，包含：

（a）細(xì)胞毒性絲氨酸蛋白酶-B的5’-核骨架結(jié)合區(qū)；

（b）在動物細(xì)胞中進(jìn)行操作的啟動子；以及

（c）多聚腺苷酸化序列。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的動物細(xì)胞用表達(dá)載體，其特征在于，上述載體還包含核苷酸序列，上述核苷酸序列用于編碼所要表達(dá)的蛋白質(zhì)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的動物細(xì)胞用表達(dá)載體，其特征在于，上述5’-核骨架結(jié)合區(qū)以2副本的方式存在。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的動物細(xì)胞用表達(dá)載體，其特征在于，在動物細(xì)胞中進(jìn)行操作的上述啟動子為巨細(xì)胞病毒啟動子、腺病毒后期啟動子、痘苗病毒7.5K啟動子、猿猴病毒40啟動子、SV40E1啟動子、單純皰疹病毒的胸苷激酶啟動子、呼吸道合胞體病毒啟動子、延伸因子-1α啟動子、金屬硫蛋白啟動子、β-肌動蛋白啟動子、人類白細(xì)胞介素-2基因的啟動子、人類干擾素基因的啟動子、人類白細(xì)胞介素-4基因的啟動子、人類淋巴霉素基因的啟動子或人類粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子基因的啟動子。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的動物細(xì)胞用表達(dá)載體，其特征在于，上述多聚腺苷酸化序列為牛生長激素、單純皰疹病毒來源胸苷激酶或猿猴病毒40來源多聚腺苷酸化序列。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的動物細(xì)胞用表達(dá)載體，其特征在于，上述動物細(xì)胞為中國倉鼠卵細(xì)胞、非洲綠猴腎細(xì)胞、海拉細(xì)胞、WI38、幼倉鼠腎細(xì)胞、COS細(xì)胞或馬丁達(dá)比狗腎上皮細(xì)胞。

7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的動物細(xì)胞用表達(dá)載體，其特征在于，上述蛋白質(zhì)為激素、細(xì)胞因子、抗體、肽核酸適體、纖連蛋白、親合體、高親和性多聚體或庫尼茲域。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的動物細(xì)胞用表達(dá)載體，其特征在于，上述蛋白質(zhì)為促紅細(xì)胞生成素、促紅細(xì)胞生成素類似物或抗-人表皮生長因子受體2抗體。

9.一種動物細(xì)胞，其特征在于，根據(jù)權(quán)利要求1至8中的任一項所述的表達(dá)載體來進(jìn)行轉(zhuǎn)化。

10.一種重組蛋白質(zhì)的制備方法，其特征在于，包括對上述權(quán)利要求9的轉(zhuǎn)化的動物細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)的步驟。