[發(fā)明專利]改良型腈水合酶

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201280028405.5
• 申請日: 2012-05-30
• 公開（公告）號: CN103649312B
• 公開（公告）日: 2017-03-22
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 渡邊文昭;安保貴永;原愛
• 申請（專利權(quán)）人: 三菱麗陽株式會社
• 主分類號: C12N15/09
• 分類號: C12N15/09;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;C12N9/88;C12P13/02
• 代理公司: 北京林達劉知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙)11277
• 代理人: 劉新宇,李茂家

1.一種蛋白質(zhì)，

其為以下(A)或(B)的蛋白質(zhì)；

(A)蛋白質(zhì)，其特征在于，包含在野生型腈水合酶的氨基酸序列中下述(a)、(b)、(c)、(d)和(e)的氨基酸殘基被置換為其他的氨基酸殘基、進而選自由下述(f)～(q)所組成的組的至少一個氨基酸殘基被置換為其他的氨基酸殘基而成的氨基酸序列，并且具有腈水合酶活性；

(a)β亞基的氨基酸序列中，由N末端的氨基酸殘基開始數(shù)167殘基下游的氨基酸殘基、

(b)β亞基的氨基酸序列中，由N末端的氨基酸殘基開始數(shù)219殘基下游的氨基酸殘基、

(c)β亞基的氨基酸序列中，由N末端的氨基酸殘基開始數(shù)57殘基下游的氨基酸殘基、

(d)β亞基的氨基酸序列中，由N末端的氨基酸殘基開始數(shù)114殘基下游的氨基酸殘基、

(e)β亞基的氨基酸序列中，由N末端的氨基酸殘基開始數(shù)107殘基下游的氨基酸殘基、

(f)β亞基的氨基酸序列中，由N末端的氨基酸殘基開始數(shù)218殘基下游的氨基酸殘基、

(g)β亞基的氨基酸序列中，由N末端的氨基酸殘基開始數(shù)190殘基下游的氨基酸殘基、

(h)β亞基的氨基酸序列中，由N末端的氨基酸殘基開始數(shù)168殘基下游的氨基酸殘基、

(i)β亞基的氨基酸序列中，由N末端的氨基酸殘基開始數(shù)144殘基下游的氨基酸殘基、

(j)β亞基的氨基酸序列中，由N末端的氨基酸殘基開始數(shù)133殘基下游的氨基酸殘基、

(k)β亞基的氨基酸序列中，由N末端的氨基酸殘基開始數(shù)112殘基下游的氨基酸殘基、

(l)β亞基的氨基酸序列中，由N末端的氨基酸殘基開始數(shù)105殘基下游的氨基酸殘基、

(m)β亞基的氨基酸序列中，由N末端的氨基酸殘基開始數(shù)95殘基下游的氨基酸殘基、

(n)β亞基的氨基酸序列中，由N末端的氨基酸殘基開始數(shù)17殘基下游的氨基酸殘基、

(o)β亞基的氨基酸序列中，由N末端的氨基酸殘基開始數(shù)15殘基下游的氨基酸殘基、

(p)α亞基的氨基酸序列中，由構(gòu)成輔基結(jié)合區(qū)域的氨基酸序列C(S/T)LCSC的最下游側(cè)的C殘基起67殘基下游的氨基酸殘基、

(q)α亞基的氨基酸序列中，由構(gòu)成輔基結(jié)合區(qū)域的氨基酸序列C(S/T)LCSC的最下游側(cè)的C殘基起17殘基下游的氨基酸殘基、

(B)蛋白質(zhì)，其特征在于，包含在(A)蛋白質(zhì)的氨基酸序列中除了所述置換后的氨基酸殘基之外缺失、置換和/或附加有1個或數(shù)個氨基酸殘基而成的氨基酸序列，并且具有腈水合酶活性。

2.一種DNA，其編碼權(quán)利要求1所述的蛋白質(zhì)。

3.一種DNA，其與權(quán)利要求2所述的DNA在嚴格條件下雜交并且編碼具有腈水合酶活性的蛋白質(zhì)。

4.一種重組載體，其包含權(quán)利要求2或3所述的基因DNA。

5.一種轉(zhuǎn)化體，其包含權(quán)利要求4所述的重組載體。

6.一種腈水合酶，是從培養(yǎng)權(quán)利要求5所述的轉(zhuǎn)化體而得到的培養(yǎng)物中提取的。

7.一種腈水合酶的制造方法，其特征在于，培養(yǎng)權(quán)利要求5所述的轉(zhuǎn)化體，從得到的培養(yǎng)物中提取腈水合酶。

8.一種酰胺化合物的制造方法，其特征在于，使權(quán)利要求1所述的蛋白質(zhì)或培養(yǎng)權(quán)利要求5所述的轉(zhuǎn)化體而得到的培養(yǎng)物或該培養(yǎng)物的處理物與腈化合物接觸。