[發明專利]缺失D-乳酸產生并且具有改進的貯藏期限的約氏乳桿菌菌株CNCM I-1225的衍生物

有效

• 申請號: 201280025795.0
• 申請日: 2012-03-29
• 公開（公告）號: CN103562381A
• 公開（公告）日: 2014-02-05
• 發明（設計）人: R-D·普里德莫爾;F·法塔;M·戴雷;I·揚科維奇
• 申請（專利權）人: 雀巢產品技術援助有限公司
• 主分類號: C12N9/04
• 分類號: C12N9/04;A23C9/123;A61K38/44;A61K39/09;C12P7/56;C12R1/225
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 柴云峰;黃革生

本發明一般地涉及益生菌領域。具體而言，本發明涉及具有改進特性的約氏乳桿菌菌株CNCM?I-1225的天然衍生物。例如，本發明涉及缺失D-乳酸產生并且在氧暴露下表現出提高的存活力的約氏乳桿菌菌株CNCM?I-1225的天然衍生物。

人類分離物約氏乳桿菌CNCM?I-1225，也稱為約氏乳桿菌NCC533或者嗜酸乳桿菌（Lactobacillus?acidophilus）La1、或者約氏乳桿菌Lj1（Bernet-Camard，M.F.，等人，（1997）Appl.Environ.Microbiol.63，2747-2753）是目前以商標Lc1非常成功地商業化的益生菌。

通常對于含活的益生菌的產品而言，在生產此類產品時要確保細菌在貯藏期限期間仍存活是一個挑戰，因為這些微生物對氧暴露是敏感的。因此，期望的是可以得到表現出改進的氧抗性的約氏乳桿菌CNCM?I-1225的衍生物。

約氏乳桿菌CNCM?I-1225具有幾種明確記錄的健康益處，其中例如，免疫調節活性（Haller，D.，等人，2000，Infect.Immun.68：752-759；Haller，D.，等人，2000，Gut47：79-87；或Ibnou-Zekri，N.，等人，2003，Infect.Immun.71：428-436）或病原體抑制(Bernet,M.F.,et?al.,1994,Gut,35:483-489)以及長期的安全使用歷史。

限制約氏乳桿菌CNCM?I-1225在一些產品種類，例如在意圖用于幼兒和嬰兒的產品中的應用的一個方面是從糖的發酵中主要地產生了D-乳酸同分異構體。例如，如果在MRS培養基中培養，那么約氏乳桿菌CNCM?I-1225將乳糖發酵成60:40%比率的D-和L-乳酸。

由于3歲以下嬰兒有限的D-乳酸清除（這可能導致D-乳酸酸中毒），所以CODEX?Infant?Formula?Directive建議3歲以下嬰兒避免消費D-乳酸和產生D-乳酸的細菌。

支持該結論的證據是有限的，并且主要是基于食物中D-乳酸的存在，并且并沒有基于產生D-乳酸細菌（其是胃腸道的天然居民）的施用。

因此，一些出版物挑戰該立場（Connolly，E.等人，NTRAfoods3（3），37-49，2004；Haschke-Becher，E.，等人，2008，Ann.Nutr.Metab.53：240-244，Mack，D.R.，2004，Can.J.Gastroenterol.18：671-675），但到目前為止，CODEX?Infant?Formula?Directive的建議仍沒有改變。

CODEX基本上排除了將產生D-乳酸的益生菌作為嬰兒制劑中的補充劑，但鼓勵只產生L-乳酸的菌株的遺傳改造。此類研發的實例是經遺傳修飾的生物（GMO），特別是經遺傳修飾的約氏乳桿菌菌株的產生，其中分離了d-乳酸脫氫酶（D-LDH）基因（ldhD），并通過基因替換，將ldhD基因的體外截短的克隆拷貝用于失活基因組拷貝（Lapierre，L.，等人，1999，Appl.Environ.Microbiol.65：4002-4007）。

這種經遺傳改造的菌株僅產生用于實驗室目的，并且從未用于食物產品中，因為使用重組DNA技術已經改變了其遺傳物質，并因此認為該菌株是GMO。

然而，期望的是存在這樣的可能，其允許使約氏乳桿菌菌株CNCM?I-1225的大量健康益處也可用于個體，對于所述個體，目前并不建議消費D-乳酸或者產生D-乳酸的細菌。

因此，本領域存在對天然益生菌株，特別是約氏乳桿菌菌株CNCM?I-1225的天然衍生物的強烈需求，所述約氏乳桿菌菌株CNCM?I-1225的天然衍生物缺失D-乳酸產生，但盡管如此仍是存活的，并且其在產品中表現出提高的成活率。

本發明人滿足了這些需求。

因此，本發明的目的是為本領域提供約氏乳桿菌菌株CNCM?I-1225的衍生物，其還可以應用于意圖用于嬰兒和幼兒的產品，而且考慮了CODEX?Infant?Formula?Directive的當前規定，所述約氏乳桿菌菌株CNCM?I-1225的衍生物表現出改進的貯藏穩定性，并且其是天然的，并不會被認為為GMO。

本發明人令人驚奇地發現，他們可以通過獨立權利要求的主題實現本發明的目的。從屬權利要求進一步發展了本發明的理念。