[發(fā)明專利]使用嵌合細(xì)胞因子受體逆轉(zhuǎn)腫瘤微環(huán)境的影響

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201280024856.1
• 申請日: 2012-04-05
• 公開（公告）號(hào): CN103582699B
• 公開（公告）日: 2017-03-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: A·M·琳恩;J·F·維拉
• 申請（專利權(quán)）人: 貝勒醫(yī)學(xué)院
• 主分類號(hào): C12N5/00
• 分類號(hào): C12N5/00
• 代理公司: 中國國際貿(mào)易促進(jìn)委員會(huì)專利商標(biāo)事務(wù)所11038
• 代理人: 韓威威

本申請要求2011年4月8日提交的美國臨時(shí)專利申請系列號(hào)61/473,457的優(yōu)先權(quán)，所述文獻(xiàn)通過引用的方式完整并入本文。?

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明的領(lǐng)域至少總體上包括免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)和藥學(xué)領(lǐng)域。?

背景技術(shù)

常規(guī)化療和放療法經(jīng)常產(chǎn)生不充分的益處，這強(qiáng)調(diào)對新治療藥的需要。體外擴(kuò)充的腫瘤相關(guān)抗原(TAA)特異性細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞(CTL)的過繼轉(zhuǎn)移可以有效地治療腫瘤，例如包括霍奇金淋巴瘤、鼻咽癌、神經(jīng)母細(xì)胞瘤和黑色素瘤。盡管輸注靶向癌表達(dá)的TAA的CTL在治療上有用，但是至少一些腫瘤利用多種免疫逃避機(jī)制，包括下調(diào)抗原表達(dá)，和釋放有利于形成Th2而非細(xì)胞毒性Th1型免疫反應(yīng)的可溶性免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞因子，如IL13和IL4。本發(fā)明提供為本領(lǐng)域中促進(jìn)克服這類腫瘤逃避手段的需要解決方案。?

發(fā)明簡述?

進(jìn)行性腫瘤生長可能與免疫反應(yīng)的抑制相關(guān)。許多不同的機(jī)制可以有助于免疫逃避，然而許多類型的癌癥已經(jīng)利用細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)作用來下調(diào)以摧毀癌細(xì)胞為目標(biāo)的適宜免疫反應(yīng)。它們通過分泌免疫阻抑性細(xì)胞因子做到這點(diǎn)，其中所述免疫阻抑性細(xì)胞因子起到招募調(diào)節(jié)性免疫細(xì)胞至腫瘤并直接抑制細(xì)胞毒性Th1T細(xì)胞和/或使細(xì)胞毒性Th1T細(xì)胞再極化成無效的Th2表型的作用。由癌細(xì)胞或周圍腫瘤基質(zhì)分泌的免疫阻抑性細(xì)胞因子至少包括白介素(IL)13、IL4、(轉(zhuǎn)化生?長因子β)TGF-β、IL6、IL8和IL-10。?

本發(fā)明的實(shí)施方案提供一項(xiàng)新方案以使腫瘤反應(yīng)性T細(xì)胞抵抗腫瘤微環(huán)境存在的免疫阻抑性/抑制性細(xì)胞因子。本發(fā)明的某些實(shí)施方案涉及使用轉(zhuǎn)基因嵌合細(xì)胞因子受體改善腫瘤特異性CTL的擴(kuò)充和抗腫瘤活性。?

本發(fā)明的實(shí)施方案提供一項(xiàng)新方案以使效應(yīng)Th1T細(xì)胞抵抗腫瘤微環(huán)境存在的抑制性細(xì)胞因子環(huán)境。這類實(shí)施方案包括具有嵌合受體的天然或基因修飾的腫瘤特異性T細(xì)胞，所述嵌合受體結(jié)合抑制性/阻抑性細(xì)胞因子并且使得它們的胞內(nèi)結(jié)果轉(zhuǎn)換成Th1免疫刺激性/活化信號(hào)，因此改善腫瘤特異性T細(xì)胞的功效。?

例如，本發(fā)明包括載體，如示例性雙順反子逆轉(zhuǎn)錄病毒載體，所述載體編碼與IL2和/或IL7細(xì)胞因子受體的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域融合的IL4和/或IL13細(xì)胞因子受體的胞外結(jié)構(gòu)域。類似地，本發(fā)明包括載體，如逆轉(zhuǎn)錄病毒載體，所述載體編碼與IL2和/或IL1細(xì)胞因子受體的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域融合的IL10細(xì)胞因子受體的胞外結(jié)構(gòu)域。?

在特定的實(shí)施方案中，其中IL13、IL4和/或IL10(或其他)的一種或多種存在微環(huán)境中的癌包括基本上全部實(shí)體瘤。具體的示例性癌包括至少：胰腺癌、霍奇金和非霍奇金淋巴瘤、黑色素瘤、乳腺癌、肺癌、前列腺癌、膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、肝細(xì)胞癌、卵巢癌等。?

本發(fā)明的實(shí)施方案可用來調(diào)節(jié)例如原代T細(xì)胞、天然存在的腫瘤抗原特異性細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞和NK細(xì)胞。利用本發(fā)明修飾的T/NK細(xì)胞可以在自體或同種異型環(huán)境下使用。?

在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，存在可以使負(fù)向免疫調(diào)節(jié)信號(hào)轉(zhuǎn)化成正向信號(hào)的嵌合分子。僅以舉例方式，這種方案涉及使IL-4和/或IL-13的胞外結(jié)構(gòu)域與IL-2和/或IL-7受體的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域融合。這種方案可以用來使得效應(yīng)Th1細(xì)胞抵抗腫瘤微環(huán)境中經(jīng)常存在的負(fù)向細(xì)胞因子信號(hào)。?

在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了使用嵌合細(xì)胞因子受體，與IL-2和/或IL-7受體的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域融合的IL-4和/或IL-13的胞外結(jié)構(gòu)域，?逆轉(zhuǎn)腫瘤微環(huán)境的影響。?

在特定的實(shí)施方案中，本發(fā)明允許使用嵌合細(xì)胞因子受體，例如與IL-2和IL-7受體的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域融合的IL-4和IL-13的胞外結(jié)構(gòu)域，逆轉(zhuǎn)腫瘤微環(huán)境的影響。?

在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，存在防止對細(xì)胞毒性Th1T細(xì)胞的抑制或其再極化成具有Th2表型的細(xì)胞的方法，所述方法包括步驟：修飾腫瘤特異性T細(xì)胞以包含結(jié)合抑制性或阻抑性細(xì)胞因子的嵌合受體，其中經(jīng)抑制性或阻抑性細(xì)胞因子與嵌合受體結(jié)合，從而防止對細(xì)胞毒性Th1T細(xì)胞的抑制或使其再極化，因而防止細(xì)胞毒性Th1T細(xì)胞的抑制或再極化。在特定的實(shí)施方案中，嵌合受體包含IL10、IL4和/或IL13細(xì)胞因子受體的胞外結(jié)構(gòu)域并且包含IL2和/或IL7細(xì)胞因子受體的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域。在某些實(shí)施方案中，嵌合受體包含免疫阻抑性細(xì)胞因子的胞外結(jié)構(gòu)域和傳遞Th1信號(hào)的細(xì)胞因子的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域。?