[發(fā)明專利]用于制造具有改善的同質(zhì)性的綴合物的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201280016104.0
• 申請日: 2012-03-29
• 公開（公告）號: CN103619357A
• 公開（公告）日: 2014-03-05
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 晉圣瑾
• 申請（專利權(quán)）人: 伊繆諾金公司
• 主分類號: A61K47/48
• 分類號: A61K47/48;A61P35/00
• 代理公司: 中國國際貿(mào)易促進委員會專利商標事務(wù)所 11038
• 代理人: 傅宇昌

相關(guān)申請的交叉引用

本專利申請要求2011年3月29日提交的美國臨時專利申請?zhí)?1/468,997和2011年3月29日提交的美國臨時專利申請?zhí)?1/468,981的權(quán)益，所述臨時專利申請以其全文引用的方式并入本文中。

發(fā)明背景

適用于治療癌癥和其他疾病的抗體-藥物-綴合物（Antibody-Drug-Conjugate，ADC）通常由三種不同的要素構(gòu)成：細胞結(jié)合劑；連接子；以及細胞毒性劑。通常所用的制造方法包括修飾步驟，其中細胞結(jié)合劑與雙官能連接子在室溫（約20℃）或高于室溫下反應(yīng)以形成共價連接于具有反應(yīng)性基團的連接子的細胞結(jié)合劑；和結(jié)合步驟，其中經(jīng)過修飾的細胞結(jié)合劑與細胞毒性劑反應(yīng)以形成從連接子（使用反應(yīng)性基團）到細胞毒性劑的共價化學(xué)鍵。

優(yōu)化修飾步驟(細胞結(jié)合劑與連接子的反應(yīng))需要使連接子與細胞結(jié)合劑的反應(yīng)最大化并且使連接子上的反應(yīng)性基團與（例如）水和細胞結(jié)合劑上的反應(yīng)性基團的副反應(yīng)最小化。當連接子上的反應(yīng)性基團是極具反應(yīng)性的官能團，如馬來酰亞胺時，這些副反應(yīng)尤其成問題。所述副反應(yīng)可能產(chǎn)生不合需要的反應(yīng)產(chǎn)物，如自身交聯(lián)的細胞結(jié)合劑，以及具有不能與細胞毒性劑反應(yīng)的連接子的細胞結(jié)合劑。

鑒于前述內(nèi)容，本領(lǐng)域中需要開發(fā)一種制備結(jié)合有連接子的細胞結(jié)合劑的改進方法，它產(chǎn)生高產(chǎn)量的所需種類的結(jié)合有連接子的細胞結(jié)合劑并且與大規(guī)模的制造方法相容。本發(fā)明提供了這種方法。本發(fā)明的這些和其他優(yōu)勢以及額外的本發(fā)明特征將從本文所提供的本發(fā)明描述中顯而易見。

發(fā)明概要

本發(fā)明提供一種制備結(jié)合有連接子的細胞結(jié)合劑的方法，所述方法包括在約15℃或更低的溫度下使細胞結(jié)合劑與雙官能交聯(lián)劑接觸以使連接子共價連接于細胞結(jié)合劑并且從而制備包含結(jié)合有連接子的細胞結(jié)合劑的混合物。

在一個實施方案中，本發(fā)明提供一種制備包含化學(xué)偶合于細胞毒性劑的細胞結(jié)合劑的綴合物的方法，所述方法包括（a）在約15℃或更低的溫度下使細胞結(jié)合劑與雙官能交聯(lián)劑接觸以使連接子共價連接于細胞結(jié)合劑并且從而制備包含結(jié)合有連接子的細胞結(jié)合劑的第一混合物；（b）對第一混合物進行切向流過濾、選擇性沉淀、非吸附性色譜、吸附性過濾、吸附性色譜或其組合并且從而制備結(jié)合有連接子的細胞結(jié)合劑的經(jīng)過純化的第一混合物；（c）通過在pH值為約4到約9的溶液中使結(jié)合有連接子的細胞結(jié)合劑與細胞毒性劑反應(yīng)而使細胞毒性劑結(jié)合于經(jīng)過純化的第一混合物中的結(jié)合有連接子的細胞結(jié)合劑以制備包含以下的第二混合物：（i）經(jīng)連接子化學(xué)偶合于細胞毒性劑的細胞結(jié)合劑，（ii）游離細胞毒性劑，以及（iii）反應(yīng)副產(chǎn)物；以及（d）對第二混合物進行切向流過濾、選擇性沉淀、非吸附性色譜、吸附性過濾、吸附性色譜或其組合，以從第二混合物的其他組分中純化經(jīng)連接子化學(xué)偶合于細胞毒性劑的細胞結(jié)合劑并且從而制備經(jīng)連接子化學(xué)偶合于細胞毒性劑的細胞結(jié)合劑的經(jīng)過純化的第二混合物。

本發(fā)明的另一個實施方案提供一種制備包含化學(xué)偶合于細胞毒性劑的細胞結(jié)合劑的綴合物的方法，所述方法包括（a）在約15℃或更低的溫度下使細胞結(jié)合劑與雙官能交聯(lián)劑接觸以使連接子共價連接于細胞結(jié)合劑并且從而制備包含結(jié)合有連接子的細胞結(jié)合劑的第一混合物；（b）通過在pH值為約4到約9的溶液中使結(jié)合有連接子的細胞結(jié)合劑與細胞毒性劑反應(yīng)而使細胞毒性劑結(jié)合于第一混合物中的結(jié)合有連接子的細胞結(jié)合劑以制備包含以下的第二混合物：（i）經(jīng)連接子化學(xué)偶合于細胞毒性劑的細胞結(jié)合劑，（ii）游離細胞毒性劑，以及（iii）反應(yīng)副產(chǎn)物；以及（c）對第二混合物進行切向流過濾、選擇性沉淀、非吸附性色譜、吸附性過濾、吸附性色譜或其組合，以從第二混合物的其他組分中純化經(jīng)連接子化學(xué)偶合于細胞毒性劑的細胞結(jié)合劑并且從而制備經(jīng)連接子化學(xué)偶合于細胞毒性劑的細胞結(jié)合劑的經(jīng)過純化的第二混合物。

本發(fā)明還包括一種包含化學(xué)偶合于細胞毒性劑的細胞結(jié)合劑的綴合物，它根據(jù)本文所描述的方法來制備。

發(fā)明詳述