[發明專利]回收植物來源的蛋白質的方法

在審

• 申請號: 201280014186.5
• 申請日: 2012-03-23
• 公開（公告）號: CN103502261A
• 公開（公告）日: 2014-01-08
• 發明（設計）人: 馬農·科圖雷;達尼·帕克特;路易斯-菲利普·韋齊納
• 申請（專利權）人: 麥迪卡格公司
• 主分類號: C07K1/14
• 分類號: C07K1/14;C07K14/415;C12N15/00;C12N15/82
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 彭鯤鵬;盧蓓

1.回收植物來源的蛋白質或植物來源的超結構蛋白的方法,其包括：

a.獲取植物或植物物質,其包含定位于質外體的植物來源的蛋白質或定位于質外體的植物來源的超結構蛋白；

b.處理所述植物或植物物質以松動細胞壁,從而產生具有松動細胞壁的植物或植物物質,由此使得釋放包含所述植物來源的蛋白質或所述植物來源的超結構蛋白的質外體級分；以及

c.回收所述包含所述植物來源的蛋白質或所述植物來源的超結構蛋白的質外體級分。

2.根據權利要求1所述的方法,其中在所述處理步驟(步驟b)中包括化學處理、酶處理、生物處理、物理處理或其組合。

3.根據權利要求2所述的方法,其中所述物理處理包括超聲。

4.根據權利要求2所述的方法,其中所述化學處理包括用一種或多于一種螯合劑、質子供體、羥基自由基、氫氧化鉀、吲哚-3-乙酸、咪唑或其組合進行處理。

5.根據權利要求2所述的方法,其中所述酶處理包括酶滲入。

6.根據權利要求5所述的方法,其中所述酶滲入包括用一種或多于一種果膠酶、一種或多于一種纖維素酶、或者一種或多于一種果膠酶和一種或多于一種纖維素酶進行滲入。

7.根據權利要求4所述的方法,其中所述螯合劑是乙二胺四乙酸(EDTA)或乙二醇四乙酸(EGTA)。

8.根據權利要求2所述的方法,其中所述生物處理包括用一種或更多種擴展蛋白、生長素或其組合進行處理。

9.根據權利要求2所述的方法,其中所述酶處理包括用一種或多于一種果膠酶、一種或多于一種纖維素酶、或者一種或多于一種果膠酶和一種或多于一種纖維素酶進行處理。

10.根據權利要求9所述的方法,其中所述酶組合物不包括脂肪酶、蛋白酶或果膠酶中的一種或更多種。

11.根據權利要求1所述的方法,其中在所述獲取步驟(步驟a)中,用編碼所述蛋白質或超結構蛋白的核酸序列轉化所述植物,所述蛋白質或超結構蛋白選自以下的組：肽、蛋白質、蛋白花環、蛋白復合物、蛋白酶體、代謝區室、轉錄復合物、重組復合物、光合復合物、膜轉運復合物、核孔復合物、蛋白納米顆粒、糖蛋白、抗體、多克隆抗體、單克隆抗體、單鏈單克隆抗體、病毒樣顆粒、病毒包膜蛋白、病毒結構蛋白、病毒衣殼蛋白和病毒外殼蛋白、嵌合蛋白、嵌合蛋白復合物、嵌合蛋白納米顆粒、嵌合糖蛋白、嵌合抗體、嵌合單克隆抗體、嵌合單鏈單克隆抗體、嵌合血凝素、病毒包膜蛋白、病毒結構蛋白、病毒衣殼蛋白和病毒外殼蛋白,以及收獲所述植物或植物物質。

12.根據權利要求11所述的方法,其中所述核酸以瞬時方式引入所述植物中。

13.根據權利要求11所述的方法,其中所述核酸穩定整合進所述植物的基因組。

14.根據權利要求1所述的方法,其中在所述獲取步驟(步驟a)中,培養所述植物并收獲所述植物或植物物質。

15.根據權利要求11所述的方法,其中所述核酸編碼單克隆抗體或流感血凝素。

16.根據權利要求1所述的方法,其中所述植物來源的蛋白質或超結構蛋白不包括神經氨酸酶或M蛋白。

17.根據權利要求1所述的方法,其中所述植物物質選自葉和培養植物細胞的組。

18.根據權利要求1所述的方法,其還包括步驟d)從所述質外體內容物級分中純化所述植物來源的蛋白質或超結構蛋白。

19.根據權利要求18所述的方法,其中所述純化步驟d)包括利用深層過濾來過濾所述質外體內容物級分以產生澄清的提取物,然后用體積排阻層析、陽離子交換樹脂或親和層析或者其組合來進行所述澄清提取物的層析。

20.根據權利要求1所述的方法,其還包括步驟d)將所述質外體內容物級分中的蛋白質或超結構蛋白與細胞碎片和不溶物質分離。

21.根據權利要求20所述的方法,其中所述分離步驟d)通過離心、深層過濾或其組合進行。