[發明專利]使用乳頭溢液的乳癌診斷

無效

• 申請號: 201280008382.1
• 申請日: 2012-01-26
• 公開（公告）號: CN103842822A
• 公開（公告）日: 2014-06-04
• 發明（設計）人: 愛德華·R·紹特
• 申請（專利權）人: 北達科他大學
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574
• 代理公司: 北京律盟知識產權代理有限責任公司 11287
• 代理人: 王璐

相關申請案的交叉引用

本申請案主張2011年2月10日申請的美國臨時專利申請案序列號61/441,452的優先權。

關于聯邦贊助的研究的聲明

本發明是依據美國國家衛生研究院授予的授權號CA119095由政府支持完成。政府在本發明中享有某些權利。

技術領域

本發明大體上涉及乳頭溢液中所存在的一組糖類生物標記物和蛋白質生物標記物的檢測以及其在創傷性乳房活組織檢查之前或代替創傷性乳房活組織檢查進行乳癌診斷的用途。

背景技術

由可靠的預測方法輔助的乳癌早期檢測有助于成功的疾病治療和管理。早期檢測是促成過去10年里乳癌死亡率每年降低2.3％的主要因素。盡管如此，在2009年，美國仍有40,170名女性死于乳癌。另外，美國還有250萬乳癌幸存者仍處于增長的患第二次乳癌的風險下。當進行創傷性活組織檢查來排除癌癥時，這些介入中大約66-85％僅發現良性疾病。

目前最佳的早期檢測方法是基于成像，但經由微創或非創傷性方法可獲得的組織及/或流體中生化標記物的定量為一項有吸引力的替代方案。所述方法可能更便宜、更快、更安全且更普遍地采用；另外，如果可以鑒別出更適當的生物標記物和檢測方法，它們有希望分別提供更大特異性和敏感性。雖然在以鑒別可能最終提供臨床效用的新穎生物標記物和/或其組合為目標的發現領域中已有相當多的嘗試，但是很少候選物已經受嚴格的驗證和/或確認。

近來，已顯示乳頭抽吸乳房流體有望輔助原位乳癌和侵襲性乳癌的成本有效并且非創傷性檢測。一類乳頭溢液，即乳頭抽吸液(NAF)可以通過非創傷性方式以低成本從高達95％的女性獲得(紹特(Sauter)等人(1997)英國癌癥雜志(Br?Cancer)76：494-501)。在這些癌癥患者中，NAF還含有相對較高含量的由乳房導管和小葉上皮細胞所分泌的蛋白質、糖類和脂質，但僅少量癌細胞(格林斯基(Glinsky)(2001)癌癥研究(Cancer?Research)61：4851-4857；熊(Hsiung)等人，癌癥雜志(Cancer?Journal)(2002)8，303-310)。

在乳癌中發現了湯姆森-弗里德里希(Thomsen-Friedenreich，TF；半乳糖-β-(1→3)-N-乙酰基-D-半乳糖胺)抗原，但健康乳房組織中沒有(斯普林格(Springer)等人(1980)癌癥(Cancer)45：2949-29541)。已報導，TF呈現于70％到90％乳腺癌的細胞表面蛋白質和脂質上(斯普林格(1984)科學(Science)224：1198-1206)。患有乳房異型性和癌癥的絕經后(而非絕經前)女性的乳頭溢液(包括生理性或病理性的NAF以及自發乳頭溢液)中TF上調，并且在絕經后女性中有83％的幾率正確分類癌癥或異常與良性病變(多伊徹(Deutscher)等人(2010)生物醫學中心癌癥學(BMC?Cancer)10：519)。

在某些研究中，超過85％的導管乳癌患者為TF抗原陽性，而超過94％的良性乳房疾病患者為陰性(斯普林格等人(1980)癌癥，45：2949-29541；斯普林格(1984)科學，224：1198-1206)。TF是連接到糖蛋白上的絲氨酸/蘇氨酸的早期分化糖類抗原，并且可以在癌癥相關性糖脂和神經酰胺上發現。TF抗原在健康個體中被共價遮蔽，但在超過90％的癌瘤患者中被暴露并且具有免疫反應性。已報導，在TF抗原的量與癌瘤侵襲性之間存在正相關性(斯普林格，(1984)科學224：1198-1206；格林斯基，(2001)癌癥研究61：4851-4857)。也已知存在于乳癌細胞表面上的TF抗原在轉移性沉積早期起到重要作用(格林斯基(2001)癌癥研究61：4851-4857)。在需要診斷性乳房活組織檢查的女性的乳頭抽吸液中發現TF抗原升高，事實上這些女性被發現患有乳房異型性和癌癥。多伊徹(2010)生物醫學中心癌癥10：519-526。

可以經由半乳糖氧化酶-希夫(galactose?oxidase-Schiff，GOS)反應檢測TF抗原。在包括乳癌以及肺癌、胰臟癌、卵巢癌、甲狀腺癌、胃癌和結腸癌在內的許多惡性腫瘤中，GOS反應得到陽性結果。已使用分光光度法分析系統在乳房組織切片中研究此反應，并且已報導此反應在乳癌組織中得到陽性結果并且在正常乳房組織中得到陰性結果(三蘇丁(Shamsuddin)(1995)癌癥研究55：149-152)。