[發明專利]一種具有降血糖活性竹葉黃酮提取物的制備方法

有效

• 申請號: 201210594892.3
• 申請日: 2012-12-31
• 公開（公告）號: CN103054038A
• 公開（公告）日: 2013-04-24
• 發明（設計）人: 郭輝;錢俊青;高帥
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學
• 主分類號: A23L1/30
• 分類號: A23L1/30;A61K36/899;A61P3/10
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;王兵

1.一種具有降血糖活性竹葉黃酮提取物的制備方法，其特征在于所述方法按如下步驟進行：

（1）將新鮮竹葉清洗、烘干后粉碎并過20目篩，獲得竹葉粉末，將竹葉粉末與水以質量比1:7~10混合后，在室溫下攪拌浸泡1~3小時，然后升溫至80~100℃下加熱回流浸提0.5~3h，冷卻至30~50℃后過濾，獲得濾液，即竹葉水提物；

（2）在步驟（1）獲得的竹葉水提物中攪拌加入絮凝劑，在室溫下靜置2~?6小時，然后離心，棄去沉淀，獲得上清液a；所述絮凝劑為海藻酸鈉、殼聚糖或羧甲基纖維素；

（3）將步驟（2）獲得的上清液a減壓濃縮后加入乙醇水溶液使乙醇體積終濃度為70~90%，靜置4~12小時后，取上清液b減壓濃縮至濃縮物無乙醇味，獲得浸膏；

（4）將步驟（3）獲得的浸膏加水配成混合液，再將混合液用萃取劑在50~80℃條件下攪拌30~?90分鐘進行萃取，萃取完全后冷卻至30~?40℃，靜置分層，獲得上層萃取液和下層萃余液，將上層萃取液減壓濃縮至混合液體積的0.3~0.5倍，即得竹葉黃酮粗提液；所述萃取劑由有機溶劑A和有機溶劑B以體積比為1000:1~5混合組成，有機溶劑A為乙酸乙酯或乙酸乙酯與異丙醇以體積比5~9:1的混合溶液；有機溶劑B為乙酸；

（5）將步驟（4）獲得竹葉黃酮粗提液進行柱層析，以體積濃度70%~80%的乙醇水溶液為洗脫劑，收集含目標組分的洗脫液，將洗脫液減壓濃縮除去水，獲得竹葉黃酮提取物。

2.如權利要求1所述的具有降血糖活性竹葉黃酮提取物的制備方法，其特征在于步驟（2）所述絮凝劑以質量濃度0.1~5%絮凝劑水溶液的形式加入。

3.如權利要求2所述的具有降血糖活性竹葉黃酮提取物的制備方法，其特征在于步驟（2）所述絮凝劑水溶液與竹葉水提物體積比為1~5:1000。

4.如權利要求2所述的具有降血糖活性竹葉黃酮提取物的制備方法，其特征在于步驟（2）所述絮凝劑以質量濃度1%絮凝劑水溶液的形式加入，絮凝劑水溶液與竹葉水提物體積比為2:1000。

5.如權利要求1所述的具有降血糖活性竹葉黃酮提取物的制備方法，其特征在于將步驟（2）獲得的上清液a體積減壓濃縮至步驟（1）獲得的竹葉水提物體積的1/20~1/30倍，加入體積濃度95%乙醇水溶液使乙醇體積終濃度為70~90%。

6.如權利要求1所述的具有降血糖活性竹葉黃酮提取物的制備方法，其特征在于步驟（4）中所述混合液是將步驟（3）獲得的浸膏加水配成步驟（1）獲得的竹葉水提物體積的1/10~1/8倍。

7.如權利要求1所述的具有降血糖活性竹葉黃酮提取物的制備方法，其特征在于步驟（4）中所述萃取劑由有機溶劑A和有機溶劑B以體積比為1000:2混合組成，有機溶劑A為乙酸乙酯或乙酸乙酯與異丙醇以體積比8:1的混合液；有機溶劑B為乙酸。

8.如權利要求7所述的具有降血糖活性竹葉黃酮提取物的制備方法，其特征在于步驟（4）中所述萃取劑的體積用量與混合液的體積比為2~5:1。

9.如權利要求1所述的具有降血糖活性竹葉黃酮提取物的制備方法，其特征在于步驟（5）中所述柱層析按如下步驟進行：將步驟（4）獲得竹葉黃酮粗提液以0.01~?0.05BV/min速度加入裝有聚乙烯聚吡咯烷酮的層析柱，先用2~5BV的蒸餾水洗脫至流出液無色，再以3~5?BV?體積濃度70%~80%的乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液，將洗脫液減壓濃縮除去水，獲得竹葉黃酮提取物。

10.如權利要求1所述的具有降血糖活性竹葉黃酮提取物的制備方法，其特征在于所述步驟（5）中聚乙烯聚吡咯烷酮用量為竹葉粉末質量的1/2。