[發明專利]淀粉廢水及麥芽根制備培養基及發酵普魯蘭多糖的方法

有效

• 申請號: 201210594838.9
• 申請日: 2012-12-31
• 公開（公告）號: CN103088085A
• 公開（公告）日: 2013-05-08
• 發明（設計）人: 喬長晟;宋亞瓊;郝華璇;李振海;李政;蓋麗豐
• 申請（專利權）人: 天津北洋百川生物技術有限公司
• 主分類號: C12P19/10
• 分類號: C12P19/10;C12R1/01
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種發酵普魯蘭多糖的方法，具體涉及一種以淀粉廢水及麥芽根制備培養基來發酵普魯蘭多糖的方法。?

背景技術

普魯蘭多糖是一類具有重要應用價值的微生物胞外多糖，成膜性、成纖維、阻氣性、生物安全且無毒的特點，使其在食品、醫藥、化工和石油領域得到廣泛應用。?

淀粉廢水是加工淀粉過程中不可避免的一種副產物，營養豐富；麥芽根為麥芽制造過程中的副產物，含有豐富的淀粉酶、麥芽酶、果酸酶及蛋白酶，富含B族維生素，并含有大量未知生長因子。?

目前文獻中報道的普魯蘭多糖發酵培養基的碳源較多的是使用耐高溫淀粉酶酶解后的淀粉或者蔗糖，價格昂貴，工藝復雜，增加了普魯蘭多糖發酵成本。此外目前缺少色素產生少和胞外多糖合成能力高的菌株，這些都促使普魯蘭多糖整體成本的上升。?

發明內容

為了解決上述由于技術不足產生的問題，進一步降低普魯蘭多糖的成本，本發明的目的在于提供一種以淀粉廢水及麥芽根制備培養基來發酵普魯蘭多糖的方法，原料來源廣泛，利用麥芽根所含有的豐富酶系和生長因子來酶解淀粉工業廢水，培養基簡單，既提高了多糖產量，降低了多糖生產成本，也解決了由淀粉廢水及麥芽根帶來的環境問題。此外，通過該方法培養的菌株色素產生能力明顯下降，減少了脫色這個步驟，大大降低了普魯蘭多糖的成本。?

為了實現上述目的，本發明采用的技術方案是：一種以淀粉廢水及麥芽根制?備培養基來發酵普魯蘭多糖的方法，包括以下步驟：?

所述培養基制備方法如下：?

(1)將麥芽根粉碎，過20目篩，制備麥芽根汁，質量濃度20%-50%；?

(2)將麥芽根汁與工業淀粉廢水按照質量比20～40:100添加混合，在38～40℃浸漬25-40min；控制溫度為45℃進行蛋白質（Pr）休止，保持20-40min，控制溫度為55℃進行第二次蛋白質休止保持30分鐘，控制溫度在63℃進行第一段糖化，保持時間40min；第二段糖化溫度為68℃，至碘液反應為無色；升溫到76～78℃，過濾，洗糟，調pH到5.6-7.4，添加2～3g/L的NaCl、0.2～0.4g/L的MgSO₄、3～5g/L的K₂HPO₄，滅菌成為培養基。?

所述發酵培養方法如下：?

(1)將出芽短梗霉(Aureobsidium?pullulans)CGMCCNO.7055菌株活化，即將其從蔗糖瓊脂培養基斜面上轉接到500ml的擋板瓶中，擋板瓶裝液量為80ml，在恒溫28℃轉速180r/min，培養30h。?

(2)以4％體積比將（1）所得種子菌液轉接到500ml培養基的擋板瓶中，擋板瓶裝液量為100ml，在恒溫28℃轉速200r/min，培養84～104h后，取發酵液離心去除菌絲體。?

(3)在上層清液中加入三倍體積的無水乙醇，攪拌，4℃放置過夜，使普魯蘭多糖充分沉淀，沉淀液以5000r/min離心30min得普魯蘭多糖沉淀，沉淀用無水乙醇洗滌2次，干燥得到白色或淺黃色多糖粗品。?

本發明的優點如下：?

本發明利用工業廢棄物-淀粉工業廢水進行普魯蘭多糖的制備，不僅能變廢為寶，大大降低普魯蘭多糖的生產成本，還會減少淀粉工業廢水對環境所造成的污染，起到了資源和環境雙贏的效果。?

本發明利用了麥芽制造廠的副產物—麥芽根中的豐富酶系代替水解酶進行廢水中的淀粉水解，還利用了麥芽根中豐富的生長因子促進出芽短梗霉菌的生長代謝，提高了普魯蘭多糖的產量。?

經本發明培養的菌株色素產生明顯降低，從而減少產品脫色步驟，大大降低了成本。?

具體實施實例

下面結合具體實例對本發明作進一步的說明。?

實施例1?

一種以淀粉廢水及麥芽根制備材料來發酵普魯蘭多糖的方法，包括以下步驟：?

一、將麥芽根粉碎，過20目篩，制備麥芽根汁濃度50%。?

二、將麥芽根汁與工業淀粉廢水按照質量比20:100的添加混合→浸漬(38～40℃，30min)→Pr休止I(45℃，30min)→Pr休止II(55℃，30min)→第一段糖化(63℃，40min)→第二段糖化(68℃，至碘液反應為無色→升溫(76～78℃)→過濾→洗槽→調節pH至5.8，添加2g/L的NaCl、0.2g/L的MgSO₄、3g/L的K₂HPO₄經滅菌成為培養基。?