[發明專利]一種電噴法制備溫敏性半乳糖乙烯酯納米顆粒的方法

有效

• 申請號: 201210594304.6
• 申請日: 2012-12-31
• 公開（公告）號: CN103073682A
• 公開（公告）日: 2013-05-01
• 發明（設計）人: 朱利民;石萌;權靜;孫衎;武晉嫻
• 申請（專利權）人: 東華大學
• 主分類號: C08F226/06
• 分類號: C08F226/06;C08F218/14;C08F4/04;B82Y40/00
• 代理公司: 上海泰能知識產權代理事務所 31233
• 代理人: 黃志達

技術領域

本發明屬于半乳糖乙烯酯材料的制備領域，特別涉及一種電噴法制備溫敏性半乳糖乙烯酯納米顆粒的方法。

背景技術

電噴法又稱靜電霧化法,是一個比較新且簡單的制備微球或者微米至納米級物質的方法。電噴法的原理與靜電紡的類似，通過靜電作用力對聚合物溶液進行拉伸，關鍵在于聚合物的溶液濃度要低于某個臨界濃度，使得聚合物溶液不連續成絲而是形成一個個小球。電噴過程中，不同的電壓、推進速度、接收距離等條件因素下得到的一系列不同粒徑及微觀形態的微球。

D-半乳糖能夠與肝實質細胞表面特有的去唾液酸糖蛋白受體（ASGPR）特異性結合，因而具有公認的肝靶向性，許多糖類聚合物具有糖簇效應，ASGPR對半乳糖基的識別作用依賴于配體分子表面的半乳糖基單位的密度。

N-乙烯基己內酰胺（NVCL）屬于乙烯基化的內酰胺化合物，其LCST值處于生理溫度范圍內（30~40°C）。具有良好的生物適應性，并且其聚合物水解后沒有毒性，沒有氨基衍生物的生成，使得其系列高聚物在生物和醫藥材料中具有極其廣泛的應用前景。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種電噴法制備溫敏性半乳糖乙烯酯納米顆粒的方法，本發明的方法融合了綠色高效的合成和安全易操作的電噴法；本發明制備的納米級顆粒具有溫度可控的釋放特性，同時又具備特異的生物相容性。

本發明的一種電噴法制備溫敏性半乳糖乙烯酯納米顆粒的方法，包括：

（1）將己二酸二乙烯酯與半乳糖溶于無水吡啶中，利用酶促合成技術合成半乳糖二酸二乙烯酯，分離提純，其中己二酸二乙烯酯與半乳糖的摩爾比為1:1~1:4；

（2）將半乳糖二酸二乙烯酯與N-乙烯基己內酰胺加入到溶劑中，溶解，加入引發劑，抽真空充氮氣保護下加熱至60~70℃，恒溫，進行自由基聚合反應，其中半乳糖二酸二乙烯酯與N-乙烯基己內酰胺按摩爾比1:1~1:20，引發劑的加入量占總混合物質量的0.5%~2.5%；

（3）自由基聚合結束后，混合物進行溶解，聚沉，棄去上清液得到溫敏性的半乳糖酯聚合物；

（4）將上述得到的溫敏性半乳糖酯聚合物，干燥，加入無水乙醇，攪拌，超聲后得到電噴液，然后進行電噴，即得到溫敏性半乳糖酯的納米顆粒，其中電噴液的質量體積濃度為5%~25%。

所述步驟（1）中酶促合成技術為：所用的酶為枯草芽孢桿菌堿性蛋白酶，質量濃度為5%~25%，反應是在40~50°C的恒溫振蕩器中進行的，振蕩器的轉速為220r/min，反應時間為3~4天。

所述步驟（1）中分離提純方法為：硅膠層析柱分離提純，洗脫劑為乙酸乙酯，展開劑為體積比為17:3:1的乙酸乙酯、甲醇和水，用I₂顯色。

所述步驟（2）中的溶劑為N,N-二甲基甲酰胺DMF。

所述步驟（2）中自由基聚合反應時間為12~24h。

所述步驟（2）中的引發劑為偶氮二異丁腈AIBN。

所述步驟（2）中引發劑的加入量占總質量的1%~2%。

所述步驟（3）中溶解添加試劑為甲醇，聚沉添加試劑為無水乙醚。

所述步驟（4）中電噴液的質量體積濃度為5%，10%，15%或25%。

所述步驟（4）中的電噴工藝參數為：注射器規格為1ml，針頭內徑為0.4~0.6mm，噴出流速0.6~1.5ml/h，靜電壓10~15kv，接收屏采用鋁箔接地接收，接收距離為10~15cm，調節電噴參數進行電噴。

所述步驟（4）中所得納米顆粒的粒徑為200~300nm。

電噴液的濃度用質量體積濃度：g/100ml，1%就是10mg/ml。

溫敏性半乳糖乙烯酯聚合物經電噴法制得的納米顆粒，其大小受聚合物的濃度的影響較小，因為當其處于較低的濃度時，都可以通過電噴得到納米顆粒，在相同的電噴條件下，不同濃度的電噴液得到的電噴顆粒大小幾近相同，只有當濃度高于某一濃度值時，可以通過靜電紡的方法制備得納米纖維。但是電噴顆粒的大小受電壓，電噴流速的影響較大，發現通過電噴流速的調節得到的納米顆粒粒徑越來越小，當同一流速下提高電壓時發現電噴顆粒變得更小更均勻。

有益效果

（1）本發明的方法融合了綠色高效的合成和安全易操作的電噴法；

（2）本發明的制備方法操作簡單、產物易處理并且經濟環保；

（2）本發明的納米級顆粒具有溫度可控的釋放特性，同時又具備特異的生物相容性。

附圖說明