[發明專利]一種海參活性膠原蛋白的提取方法

無效

• 申請號: 201210589099.4
• 申請日: 2012-12-29
• 公開（公告）號: CN103060409A
• 公開（公告）日: 2013-04-24
• 發明（設計）人: 周偉麗
• 申請（專利權）人: 青島安芙蘭生物科技有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及膠原蛋白提取技術領域，具體涉及一種海參活性膠原蛋白的提取方法。

背景技術

海參中含有大量的膠原蛋白，具有抗凝血、免疫調節、降血脂、抗病毒、抗腫瘤等多種藥理作用，而保持活性的海參膠原蛋白的應用價值更高，但目前膠原蛋白的提取工藝均會破壞其三維螺旋結構，大大降低了其膠原蛋白的科研及應用價值。

發明內容

為解決上述技術問題，本發明的目的是提供一種海參活性膠原蛋白的提取方法。

本發明的技術方案是：包括以下提取步驟：

(1)?把鮮活海參除去內臟，用剪刀剔除內壁肌肉層，剩余海參體壁用刀切成碎塊；

(2)?加入10倍重量的蒸餾水，攪拌30?min，用紗布濾出，再加入10倍重量的蒸餾水重洗一次；

(3)?然后將海參碎塊放于10倍重量的0.1?mol/L?Tris-HCl溶液中，溶液pH為8.0，還含有4?m?mol/L?的EDTA，攪拌過夜；

(4)?用紗布過濾后，再用蒸餾水洗2次，置于10倍重量的蒸餾水中攪拌過夜，溶液中即充滿絮狀膠原纖維，用紗布濾出未解離的海參塊，重復上述操作；

(5)?將溶液以12000rpm離心30?min；

(6)?所得膠原纖維沉淀加入25倍體積的0.1?mol/L?NaOH溶液中，攪拌2d；

(7)?12000rpm離心30min，沉淀水洗至中性，加入25倍體積的0.5?mol/L乙酸，加入0.5％的胃蛋白酶，攪拌、消化2天；

(8)?12000rpm離心30min，上清液緩慢加入研磨精細的NaCl，溶液終濃度為0.9?mol/L，攪拌過夜；

(9)?12000rpm離心30min，去上清，沉淀加入少許0.5?mol/L乙酸溶解，轉入透析袋內對0.1?mol/L乙酸透析2d，再用蒸餾水透析2d，冷凍干燥后即得活性膠原蛋白，以上所有操作均在4℃下進行。

本發明工藝簡單，提取率高，且膠原蛋白的三維螺旋結構保存完好，具有較高的科研和應用價值。

具體實施方式

實施例1

一種即食海參加工新工藝，包括以下提取步驟：

(1)?把鮮活海參除去內臟，用剪刀剔除內壁肌肉層，剩余海參體壁用刀切成碎塊；

(2)?加入10倍重量的蒸餾水，攪拌30?min，用紗布濾出，再加入10倍重量的蒸餾水重洗一次；

(3)?然后將海參碎塊放于10倍重量的0.1?mol/L?Tris-HCl溶液中，溶液pH為8.0，還含有4?m?mol/L?的EDTA，攪拌過夜；

(4)?用紗布過濾后，再用蒸餾水洗2次，置于10倍重量的蒸餾水中攪拌過夜，溶液中即充滿絮狀膠原纖維，用紗布濾出未解離的刺參塊，重復上述操作；

(5)?將溶液以12000rpm離心30?min；

(6)?所得膠原纖維沉淀加入25倍體積的0.1?mol/L?NaOH溶液中，攪拌2d；

(7)?12000rpm離心30min，沉淀水洗至中性，加入25倍體積的0.5?mol/L乙酸，加入0.5％的胃蛋白酶，攪拌、消化2天；

(8)?12000rpm離心30min，上清液緩慢加入研磨精細的NaCl，溶液終濃度為0.9?mol/L，攪拌過夜；

(9)?12000rpm離心30min，去上清，沉淀加入少許0.5?mol/L乙酸溶解，轉入透析袋內對0.1?mol/L乙酸透析2d，再用蒸餾水透析2d，冷凍干燥后即得活性膠原蛋白，以上所有操作均在4℃下進行。

上述實施例不作為對本發明的限定，凡在本發明的范圍內所作的任何修改、等同替換、改進等，均屬于本發明的保護范圍。