[發(fā)明專利]一種海參活性膠原蛋白的提取方法無(wú)效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201210589099.4 | 申請(qǐng)日： | 2012-12-29 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN103060409A | 公開(kāi)（公告）日： | 2013-04-24 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 周偉麗 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 青島安芙蘭生物科技有限公司 |
| 主分類號(hào)： | C12P21/06 | 分類號(hào)： | C12P21/06 |
| 代理公司： | 暫無(wú)信息 | 代理人： | 暫無(wú)信息 |
| 地址： | 266108 山東省青*** | 國(guó)省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 海參 活性 膠原 蛋白 提取 方法 | ||
1.一種海參活性膠原蛋白的提取方法，其特征在于：包括以下提取步驟：
(1)?把鮮活海參除去內(nèi)臟，用剪刀剔除內(nèi)壁肌肉層，剩余海參體壁用刀切成碎塊；
(2)?加入10倍重量的蒸餾水，攪拌30?min，用紗布濾出，再加入10倍重量的蒸餾水重洗一次；
(3)?然后將海參碎塊放于10倍重量的0.1?mol/L?Tris-HCl溶液中，溶液pH為8.0，還含有4?m?mol/L?的EDTA，攪拌過(guò)夜；
(4)?用紗布過(guò)濾后，再用蒸餾水洗2次，置于10倍重量的蒸餾水中攪拌過(guò)夜，溶液中即充滿絮狀膠原纖維，用紗布濾出未解離的海參塊，重復(fù)上述操作；
(5)?將溶液以12000rpm離心30?min；
(6)?所得膠原纖維沉淀加入25倍體積的0.1?mol/L?NaOH溶液中，攪拌2d；
(7)?12000rpm離心30min，沉淀水洗至中性，加入25倍體積的0.5?mol/L乙酸，加入0.5％的胃蛋白酶，攪拌、消化2天；
(8)?12000rpm離心30min，上清液緩慢加入研磨精細(xì)的NaCl，溶液終濃度為0.9?mol/L，攪拌過(guò)夜；
(9)?12000rpm離心30min，去上清，沉淀加入少許0.5?mol/L乙酸溶解，轉(zhuǎn)入透析袋內(nèi)對(duì)0.1?mol/L乙酸透析2d，再用蒸餾水透析2d，冷凍干燥后即得活性膠原蛋白，以上所有操作均在4℃下進(jìn)行。
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