[發明專利]一種尿液中肌酐的液相色譜串聯質譜測定方法

無效

• 申請號: 201210588726.2
• 申請日: 2012-12-29
• 公開（公告）號: CN102980968A
• 公開（公告）日: 2013-03-20
• 發明（設計）人: 侯宏衛;張小濤;田永峰;劉彤;陳歡;韓書磊;胡清源
• 申請（專利權）人: 國家煙草質量監督檢驗中心
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 鄭州中民專利代理有限公司 41110
• 代理人: 姜振東

1.一種尿液中肌酐的液相色譜串聯質譜測定方法，其特征在于：包括以下工藝步驟：

a、收集志愿者尿液；

b、樣品前處理：室溫下解凍尿液樣品，混合均勻后，取1?mL的尿液并加入10?μL的甲酸酸化到pH=2.5左右，在10000?轉/min的條件下離心10?min，離心的混合物過0.22?μm聚醚砜水相濾膜，取5?μL濾液于10?mL棕色容量瓶，加入100?μL濃度為1?μg/mL的肌酐-d3，用純水定容至刻度；

c、標準工作液的配制：用純水配制不同濃度的肌酐標準工作溶液

d、液相色譜-串聯質譜（LC-MS/MS）測定，吸取配制好的不同濃度的肌酐標準工作溶液，注入LC-MS/MS系統，肌酐的線性回歸方程為y=0.0106x+0.00615，其中Y代表分析物與內標峰面積的比值，X表示尿液中目標分析物的濃度，相關系數大于0.999，對樣品待測液進行測定，測得分析物與內標峰面積的比值，代入一元線性回歸方程，求得樣品待測液中分析物的含量。

2.根據權利要求1所述的尿液中肌酐的液相色譜串聯質譜測定方法，其特征在于：步驟b中的稀釋過程依次加入的肌酐-d3和離心過濾后的尿液的體積分別為100?μL和5?μL。

3.根據權利要求1所述的尿液中肌酐的液相色譜串聯質譜測定方法，其特征在于：在步驟d中，所述的色譜分析條件采用Agilent?Zorbax?Eclipse?XDB-C18色譜柱色譜柱，初始流動相體系選取50%?溶劑A（0.1%?乙酸水溶液）和50%?溶劑B（0.1%?乙酸甲醇溶液），分析時間為12?min，進樣量為5?μL。

4.根據權利要求3所述的尿液中肌酐的液相色譜串聯質譜測定方法，其特征在于：采用色譜柱分析時，選取的洗脫條件：50%0.1%?乙酸水溶液和50%的0.1%?乙酸甲醇溶液等度洗脫，流動相流速為200?μL/min。

5.根據權利要求1所述的尿液中肌酐的液相色譜串聯質譜測定方法，其特征在于：串聯質譜檢測器的條件：電噴霧離子源，多反應監測正離子掃描方式；電噴霧電壓為5000V,?霧化氣為40?psi,?氣簾氣的量為30?psi,?輔助加熱氣的流速為40?psi,?離子源溫度為480?oC，射入電壓：10?V,?碰撞能：29?eV；?去簇電壓：73?V，駐留時間：100?ms。