[發(fā)明專利]一種氨基脲(SEM)衍生化試劑及其使用方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210586467.X
• 申請(qǐng)日: 2012-12-31
• 公開（公告）號(hào): CN103105488A
• 公開（公告）日: 2013-05-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 戴信敏
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 戴信敏
• 主分類號(hào): G01N33/543
• 分類號(hào): G01N33/543
• 代理公司: 北京北翔知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11285
• 代理人: 寧濤;張廣育

1.一種氨基脲衍生化試劑，其特征在于所述的氨基脲衍生化試劑為帶有特異性小分子標(biāo)記的醛基苯甲酸，所述醛基苯甲酸能通過醛基與氨基脲的氨基反應(yīng)，形成帶有特異性小分子標(biāo)記的氨基脲-醛基苯甲酸衍生物。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的氨基脲衍生化試劑，其特征在于所述的特異性小分子標(biāo)記是能夠與特異性蛋白或抗體結(jié)合的小分子，包括生物素、地高辛、組氨酸、熒光分子，所述熒光分子包括CY-5、CY-3、FITC、FAM。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的氨基脲衍生化試劑，其特征在于所述的特異性小分子標(biāo)記通過一段短臂連接在醛基苯甲酸的羧基上，短臂為任選地?fù)诫sN或O或S或P的2-30個(gè)C的直鏈分子。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的氨基脲衍生化試劑，其特征在于所述醛基苯甲酸為對(duì)醛基苯酸衍生物或鄰醛基苯甲酸。

5.一種檢測樣品中氨基脲方法，包括：

(1)用抗氨基脲-醛基苯甲酸衍生物抗體包被酶標(biāo)板；

(2)使樣品與帶有特異性小分子標(biāo)記的醛基苯甲酸接觸，形成帶有特異性小分子標(biāo)記的氨基脲-醛基苯甲酸衍生物；

(3)將步驟(2)得到的混合物加入步驟(1)的酶標(biāo)板中，使所述帶有特異性小分子標(biāo)記的氨基脲-醛基苯甲酸衍生物固定在酶標(biāo)板上；

(4)再向所述酶標(biāo)板中加入能與所述特異性小分子標(biāo)記結(jié)合的酶標(biāo)二抗，使其與所述特異性小分子標(biāo)記反應(yīng)；

(5)對(duì)步驟(4)中發(fā)生的反應(yīng)進(jìn)行檢測，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算氨基脲的含量。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于所述的氨基脲衍生化試劑被溶解于極性溶劑中，所述極性溶劑選自甲醇、水、乙醇、DMSO、DMF及其混合物。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于所述的酶標(biāo)板采用96孔酶標(biāo)板，并封閉板上未包被抗體的空白孔。

8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于所述抗氨基脲-醛基苯甲酸衍生物抗體為鼠單抗、兔多抗及基因工程抗體中的任意一種。

9.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于所述的酶標(biāo)二抗為辣根過氧化物酶或堿性磷酸酶標(biāo)記的、能與所述特異性小分子標(biāo)記結(jié)合的蛋白或抗體及其偶聯(lián)物，所述蛋白或抗體及其偶聯(lián)物選自親和素/鏈霉親和素、地高辛抗體、組氨酸抗體/含Ni親和分子、熒光分子抗體。

10.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于所述檢測是用酶標(biāo)儀測量吸光度。

11.一種檢測樣品中氨基脲的試劑盒，其特征在于包括：

(1)帶有特異性小分子標(biāo)記的醛基苯甲酸；

(2)包被有抗氨基脲-醛基苯甲酸衍生物抗體的酶標(biāo)板；

(3)酶標(biāo)二抗。

12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的試劑盒，其特征在于所述的特異性小分子標(biāo)記是能夠與特異性蛋白或抗體結(jié)合的小分子，包括生物素、地高辛、組氨酸、熒光分子，所述熒光分子包括CY-5、CY-3、FITC、FAM。

13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的試劑盒，其特征在于所述的特異性小分子標(biāo)記通過一段短臂連接在醛基苯甲酸的羧基上，短臂為任選地?fù)诫sN或O或S或P的2-30個(gè)C的直鏈分子。

14.根據(jù)權(quán)利要求11所述的試劑盒，其特征在于所述抗氨基脲-醛基苯甲酸衍生物抗體為鼠單抗、兔多抗及基因工程抗體中的任意一種。

15.根據(jù)權(quán)利要求11所述的試劑盒，其特征在于所述的酶標(biāo)二抗為辣根過氧化物酶或堿性磷酸酶標(biāo)記的、能與所述特異性小分子標(biāo)記結(jié)合的蛋白或抗體及其偶聯(lián)物，所述蛋白或抗體及其偶聯(lián)物選自親和素/鏈霉親和素、地高辛抗體、組氨酸抗體/含Ni親和分子、熒光分子抗體。