[發(fā)明專利]一種器官型人工皮膚、其制備方法及應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210585481.8
• 申請日: 2012-12-28
• 公開（公告）號: CN103893831A
• 公開（公告）日: 2014-07-02
• 發(fā)明（設計）人: 黃亞東;張齊好;項琪;蘇志堅;戴桃李
• 申請（專利權(quán)）人: 廣州暨南大學醫(yī)藥生物技術(shù)研究開發(fā)中心
• 主分類號: A61L27/60
• 分類號: A61L27/60;A61L27/22;A61F2/10
• 代理公司: 中科專利商標代理有限責任公司 11021
• 代理人: 紀曉峰

1.一種器官型人工皮膚，其由包括以下成分的生物材料構(gòu)建而成：成纖維細胞、脫細胞羊膜、基質(zhì)材料及角質(zhì)形成細胞。

2.一種器官型人工皮膚，其由包括以下成分的生物材料構(gòu)建而成：成纖維細胞、羊水干細胞、基質(zhì)材料及角質(zhì)形成細胞。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的人工皮膚，其特征在于其中所述成纖維細胞為分離自哺乳動物皮膚的成纖維細胞，優(yōu)選人源成纖維細胞，包括分離的原代幼兒皮膚成纖維細胞、成人皮膚成纖維細胞和幼兒包皮成纖維細胞，最優(yōu)選幼兒包皮成纖維細胞。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項所述的人工皮膚，其特征在于其中所述基質(zhì)材料為親水性高分子材料，所述親水性高分子材料優(yōu)選地由天然的或合成的細胞外基質(zhì)蛋白形成。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的人工皮膚，其特征在于所述細胞外基質(zhì)蛋白選自纖維連接蛋白、層粘連蛋白、I型膠原蛋白、III型膠原蛋白、IV型膠原蛋白、玻璃粘連蛋白或其組合，優(yōu)選是合成的細胞外基質(zhì)蛋白，更優(yōu)選是人重組III型膠原蛋白或人重組IV型膠原蛋白。

6.根據(jù)權(quán)利要求2-5中任一項所述的人工皮膚，其特征在于所述羊水干細胞分離自哺乳動物孕期羊水，優(yōu)選哺乳動物孕中期的羊水，經(jīng)體外培養(yǎng)而得。

7.一種器官型人工皮膚的制備方法，該方法包括以下步驟：

1)將體外培養(yǎng)的成纖維細胞按照1×10⁵～5×10⁵個細胞/cm³的密度種植在分離自哺乳動物胎盤的脫細胞羊膜上加入培養(yǎng)基培養(yǎng)2～4天構(gòu)建成仿真皮層；

2)在所述仿真皮層上面覆蓋一層厚度約1mm的基質(zhì)材料；

3)待基質(zhì)材料凝固后，將角質(zhì)形成細胞按照1×10⁵～5×10⁵個細胞/cm³的密度接種于基質(zhì)材料上，通過氣液交界培養(yǎng)直至角質(zhì)形成細胞角質(zhì)化。

8.一種器官型人工皮膚的制備方法，該方法包括以下步驟：

1)收集雌性哺乳動物的孕期羊水，優(yōu)選哺乳動物孕中期羊水，分離羊水干細胞，選擇生長狀態(tài)良好且細胞表面上干細胞基因標志物表達陽性的羊水干細胞與膠原蛋白液混合形成膜狀凝膠；

2)將體外培養(yǎng)的成纖維細胞按照1×10⁵～5×10⁵個細胞/cm³的密度種植在步驟1)獲得的膜狀凝膠上，并加入培養(yǎng)基培養(yǎng)2～4天構(gòu)建成仿真皮層；

3)在所述仿真皮層上面覆蓋一層厚度約1mm的基質(zhì)材料；

4)待基質(zhì)材料凝固后，將角質(zhì)形成細胞按照1×10⁵～5×10⁵個細胞/cm³的密度接種于基質(zhì)材料上，通過氣液交界培養(yǎng)直至角質(zhì)形成細胞角質(zhì)化。

9.根據(jù)權(quán)利要求7或8所述的方法，其特征在于所述基質(zhì)材料為親水性高分子材料，所述親水性高分子材料優(yōu)選地由天然的或合成的細胞外基質(zhì)蛋白形成，所述細胞外基質(zhì)蛋白優(yōu)選地選自纖維連接蛋白、層粘連蛋白、I型膠原蛋白、III型膠原蛋白、IV型膠原蛋白、玻璃粘連蛋白或其組合，更優(yōu)選是合成的細胞外基質(zhì)蛋白，最優(yōu)選人重組III型膠原蛋白或人重組IV型膠原蛋白。

10.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一項所述的器官型人工皮膚在制備開放性創(chuàng)面用皮膚替代物或臨時覆蓋物的用途，所述開放性創(chuàng)面優(yōu)選是燒傷創(chuàng)面，或因創(chuàng)傷或手術(shù)引起的皮膚缺損創(chuàng)面。