[發明專利]一種螺旋藻多糖的提取方法

有效

• 申請號: 201210582368.4
• 申請日: 2012-12-28
• 公開（公告）號: CN103073652A
• 公開（公告）日: 2013-05-01
• 發明（設計）人: 梅艷;李俊
• 申請（專利權）人: 昆明振華制藥廠有限公司
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 昆明正原專利商標代理有限公司 53100
• 代理人: 金耀生

技術領域

本發明涉及同時獲得多種分子量范圍的螺旋藻多糖的提取方法。所制的不同規格的多糖可用于藥品、食品、保健品及化妝品等。?

背景技術

螺旋藻是海洋中古老的單細胞藻類，含有大量的氨基酸、藍藻素、類胡蘿卜素、γ亞麻酸、肌醇等營養物質。螺旋藻多糖是從螺旋藻藻體、螺旋藻培養液中提取分離出來的一類具有促進細胞生長、提高免疫力、抗腫瘤、抗輻射、抗衰老等功能的重要天然生物活性物質，有防治多種疾病同時還能顯著增強機體免疫力的雙重作用。?

螺旋藻中存在大量的蛋白質，和多糖一樣均屬于高分子物質，部分水溶性蛋白質和多糖一起被溶劑提取出來。去掉蛋白質是螺旋藻多糖提純的關鍵步驟，常利用氯仿正丁醇的二元溶劑體系或三氯乙酸使蛋白質變性析出。前者使用的溶劑有一定毒性且具強揮發性，給環境和操作人員一定的危害；?后者使用的三氯乙酸有一定毒性，脫蛋白后生產的鹽與多糖類似的溶解性，去除困難，也有一定的毒性，因此該方法得到的粗品運用受到限制。常利用多糖不溶于乙醇的特性對螺旋藻多糖粗提物進行精制，但該法所得到的多糖純度不高，無法除盡蛋白質，還會摻雜色素、膠質等其他雜質，而且所得物分子量范圍較寬。還有利用DEAE纖維素柱離子交換層析法、葡聚糖凝膠和瓊脂糖凝膠的凝膠柱層析等分離得純度高的、不同分子量范圍的多糖。但由于柱填料價格昂貴，大批量生產需要較多根柱子，生產成本超高，分離操作無法自動化，生產周期較長。而且柱層析需耗費大量的酸堿再生樹脂，造成二次污染，能耗大、成本高。該法不太適合大規模的多糖原料制備，僅適合實驗室和中小試運用。?

大多數提取方法為了提高多糖的收率，會采取偏堿性條件下進行提取，之后再通過調酸中和，如1994年公開的專利“螺旋藻多糖的提取方法”（授權公告號為?CN1056852C）中采用氫氧化鈉、氫氧化鉀等強堿進行提取；?2012年公開的專利“螺旋藻多糖的應用”（申請號201210134354.6）中S180小鼠移植模型的藥效學試驗中研究過螺旋藻水提多糖的相對腫瘤增值率T/C（%）高于螺旋藻堿提多糖，也就是說中性條件下提取得到的多糖對腫瘤的抑制作用優于堿性條件下。雖然堿性溶劑的提取方法可以提高提取的收率，pH值較高時破壞多糖的結構，最終得不到活性最強的多糖，不能全完發揮螺旋藻多糖的優勢。1994年公開的專利“從螺旋藻中提取蛋白質和多糖的方法”（授權公告號為?CN1036067C）中使用低溫浸泡提取同時得到藍藻蛋白和螺旋藻多糖，該方法雖然簡單，但是低溫浸泡提取提取效率低，所得的螺旋藻含量較低。2008年公開的專利“一種水溶性螺旋藻多糖的提取方法”（公開號為?CN101575626A）中使用冷凍離心法，調酸和酶解的方法獲得螺旋藻多糖，該方法通過酶水解蛋白質，提高多糖的收率。但是酶價格昂貴，生產成本增高。酶解會造成蛋白質水解為水溶性的多肽或是水溶性氨基酸。由于分子量接近，而且與多糖同樣溶于水，無法有效分離，導致多糖純度降低。而且酶提取法要求的條件苛刻，容易失活，對實驗設備要求高，不適合大規模工業化生產。?

?????所報道的螺旋藻多糖的方法雖然很多，各有利弊。但目前沒有一種可以保證產品雜質少、純度高、高生物活性、低成本的，且可以實際運用于大生產的工藝路線。對于食品和藥品安全性意識益增的今天，質量和成本都是企業的生命線。一種可以運用于工業化生產中，能有效保證螺旋藻多糖的活性、生產操作簡單、對環境和產品無污染的、產品收率和純度高的提取方法，是保證產品品質和成本所必須的，也是企業迫切需要的。?

發明內容

本發明的目的在于提供一種經濟、節約能源、無環境污染、安全無毒、提取率高、純度高、保留生物活性成分的高效價的，可進行工業化生產的螺旋藻多糖提取方法。?

本發明的技術方案為：?

同時獲得多種純度規格的螺旋藻多糖的提取方法按以下步驟進行：

（一）螺旋藻粗多糖的制備

（1）取螺旋藻，加4-10倍量的95%乙醇，回流提取1~3次，每次1~3小時，傾去乙醇，固體物晾干，加入水4-20倍量，提取1~5次，每次2~10小時，提取溫度為60~100℃，合并提取液，于≤15000?r/min轉速下離心，上清液合并，備用；

（2）取上述（1）得到上清液合并液，過≤1.5μm的微孔濾膜過濾，將濾液加入超濾機中，選擇0.5萬以上分子量的濾材進行超濾，至超濾機出口無液出時，收集超濾機流出液和超濾機內的濃縮液，干燥，得到1種以上的水提螺旋藻粗多糖，總糖含量≥10%，分子量為0.5萬以上；

（二）高純度螺旋藻多糖的制備