[發(fā)明專利]一種從丹參中快速分離紫草酸單體的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210577852.8
• 申請日: 2012-12-27
• 公開（公告）號: CN102993143A
• 公開（公告）日: 2013-03-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 文煥松;夏柯;李啟發(fā);郭建華;劉丁
• 申請（專利權(quán)）人: 成都普思生物科技有限公司
• 主分類號: C07D307/84
• 分類號: C07D307/84
• 代理公司: 成都天嘉專利事務(wù)所(普通合伙) 51211
• 代理人: 趙麗

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種中藥化學(xué)單體的制備方法，尤其是一種從中藥材丹參中快速分離高純度紫草酸單體的方法，屬中藥分離純化技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

丹參為唇形科（Lamiaceae）鼠尾草屬（Salvia）植物丹參（?Salvia?miltiorrhiza?Bge.）?的干燥根及根莖。性味苦，微寒，歸心、肝經(jīng)。活血調(diào)經(jīng)，祛瘀止痛，涼血消癰，清心除煩，養(yǎng)血安神。用于月經(jīng)不調(diào)，心煩失眠。紫草酸（lithospermic?acid），分子式為C₂₇H₂₂O₁₂，由于其在丹參中的含量很少，因此所需藥材量大，分離時間較長，且很難獲得其高純度單體。

如CN200510122346.X公開了一種丹參有效組分，制劑及其制備方法與用途。在有效組分中，以重量百分比計，紫草酸的含量為2.8-4.2%，丹酚酸B的含量為91.8-94.2%，丹酚酸E的含量為0.8-2.2%。該丹參有效組分的制備方法包括下列步驟：將丹參藥材粉碎后加入乙酸乙酯和乙醇，加熱提取得提取液，將提取液濃縮成浸膏，并將其與硅膠進行拌樣，用正相硅膠柱對其進行分離，首先用石油醚和乙酸乙酯作為流動相，得洗脫液I，棄之，然后改換氯仿和甲醇作為流動相，得洗脫液II，將洗脫液II濃縮干燥后得樣品；用制備液相色譜繼續(xù)分離得到的樣品，即得。其紫草酸含量較低，增加了制備分離難度，得率低。

由此，目前國內(nèi)關(guān)于紫草酸分離純化的文獻報道很少，高效制備液相色譜用于紫草酸單體的分離純化屬首次。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明旨在克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種從丹參中快速分離高純度紫草酸單體的方法。該方法簡便易行、消耗溶劑少、得率高，產(chǎn)品純度能夠達到98%以上，安全無毒、環(huán)保，適合工業(yè)化生產(chǎn)。

為實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

一種從紫草酸中快速分離紫草酸單體的方法，其特征在于按如下工藝步驟進行：

A.?原料提取：將丹參藥材粉碎成2-4mm粗粉投入提取罐中，按照kg/L的質(zhì)量體積比加入8-10倍量的體積分?jǐn)?shù)為30-40%的乙醇溶液提取丹酚酸B，回流提取3次，每次2小時，合并提取液，濃縮回收乙醇，水溶液冷卻至室溫；

B.?大孔吸附樹脂富集：將冷卻至室溫后的丹酚酸B水溶液以每小時2-5倍柱體積的速度通過活化好的大孔吸附樹脂柱進行吸附，然后用2-4倍量柱體積的的水洗脫雜質(zhì)，再用1-3倍量柱體積的體積分?jǐn)?shù)為50-60%乙醇溶液洗脫目標(biāo)物質(zhì)，收集洗脫液，濃縮回收乙醇，濃縮液待下一步水解處理；

C.?水解：向濃縮液液中緩緩加入濃度3~5%的氫氧化鈉水溶液調(diào)pH至11~12，靜置20~30min，待丹酚酸B水解成紫草酸，然后再以體積分?jǐn)?shù)5-10%的鹽酸水溶液將水解液pH調(diào)至中性；

D.?高效制備液相分離：先用薄層硅膠過濾水解液，然后用孔徑0.45μm的微孔濾膜過濾，上高效制備液相色譜柱分離，色譜柱填料為C18填料，流動相為體積分?jǐn)?shù)30-40%的乙腈水溶液，檢測波長286nm，紫外檢測器在線監(jiān)測，針對性收集目標(biāo)化合物色譜峰段制備溶液；

所述流動相的流速根據(jù)色譜柱內(nèi)徑大小進行確定，內(nèi)徑50mm的流速為60ml/min，內(nèi)徑80mm?的流速為140ml/min，內(nèi)徑100mm的流速為250ml/min，內(nèi)徑200mm的流速為800ml/min。

E.?產(chǎn)品回收：將步驟D所得制備溶液減壓回收乙腈，剩余水溶液-50℃冷凍成冰，然后-50℃冷凍干燥得紫草酸單體。

步驟B所述大孔吸附樹脂選自D101型或AB-8型。

本發(fā)明的優(yōu)點在于：

1、通過步驟A對所述丹參藥材的粉碎、回流提取及濃縮，充分保證了藥材中紫草酸和丹酚酸B等水溶性成分的有效提取。

2、通過步驟B以大孔吸附樹脂在相應(yīng)條件下富集丹酚酸B，確保了色素等雜質(zhì)與丹酚酸B的有效分離，起到了很好的除雜作用。

3、通過步驟C在相應(yīng)控制條件下對丹酚酸B進行水解，從而大幅度提高了紫草酸的含量，并為制備分離創(chuàng)造了有利條件。

4、采用制備型高效液相色譜系統(tǒng)對紫草酸單體進行分離，通過最適宜的前處理方法和色譜條件等，達到良好的分離效果，并且紫外檢測器在線監(jiān)測，針對性收集紫草酸單體，目標(biāo)明確，避免了常規(guī)柱層析和先分離后檢測造成的資源浪費。

5、采用制備型高效液相色譜分離過程直觀，目標(biāo)性強，對產(chǎn)品的質(zhì)量易于控制，產(chǎn)品純度可達到98%以上。

6、步驟少，耗時短，操作簡便，得率高，工藝穩(wěn)定可靠，重現(xiàn)性好，適合工業(yè)化生產(chǎn)。