[發明專利]一種劍葉龍血樹總黃酮的質量檢測方法

有效

• 申請號: 201210576245.X
• 申請日: 2012-12-26
• 公開（公告）號: CN103901119A
• 公開（公告）日: 2014-07-02
• 發明（設計）人: 鄒節明;周艷林
• 申請（專利權）人: 桂林三金藥業股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 北京元中知識產權代理有限責任公司 11223
• 代理人: 王明霞

技術領域

本發明涉及一種中藥的檢測方法，具體講，涉及一種劍葉龍血樹總黃酮的質量檢測方法。

背景技術

劍葉龍血樹收載于《廣西壯族自治區壯藥質量標準》第一卷，壯藥名為榧勒壟，具有活血散瘀、定痛止血、斂瘡生肌等功效，用于跌打損傷、淤血作痛、婦女氣血凝滯、外傷出血和膿瘡久不收口。常用作提取龍血竭的原料，本發明人從中提取精制得到有效部位—劍葉龍血樹總黃酮，用于治療冠心病心絞痛。現代研究表明其中主要含有黃酮類、二苯乙烯類、甾醇類、皂苷類等化合物，具有抗菌、抗炎、抗氧化活性，鎮痛、止血、活血化瘀等多種藥理作用。目前，針對原藥材劍葉龍血樹及提取物的質量控制標準研究，大多集中在測定其中二氫查耳酮類的代表性成分龍血素A、龍血素B，而對其他類別的主要活性成分，如黃烷類、二苯乙烯類的主要成分高純度化學對照品純化制備和含量測定研究，尚未見報道。

為此，特提出本發明。

發明內容

本發明的首要發明目的在于提出了一種劍葉龍血樹的質量檢測方法。

為了實現本發明的目的，采用的技術方案為：

本發明涉及一種劍葉龍血樹的質量檢測方法，所述檢測方法包括采用變換波長HPLC法檢測劍葉龍提取物——劍葉龍血素總黃酮中7-羥基-4'-甲氧基黃烷和/或紫檀茋的含量的步驟。

本發明的第一優選技術方案為：所述劍葉龍血樹總黃酮中含7-羥基-4'-甲氧基黃烷不少于0.05wt%，和/或含紫檀茋不少于0.10wt%。

本發明的第二優選技術方案為：所述劍葉龍血樹總黃酮中含7-羥基-4'-甲氧基黃烷不少于0.10wt%，和/或含紫檀茋不少于0.20wt%。

本發明的第三優選技術方案為：劍葉龍血樹的檢測方法包括以下步驟：

（1）取劍葉龍血樹總黃酮加有機溶劑提取，回流提取0.5～2小時；

（2）選用色譜柱，色譜柱填料為以硅膠為載體的ODS柱，規格為4.6×150mm，粒徑5μm；流動相：乙腈-0.2%磷酸溶液（36:64）；柱溫：35℃；流速：1.0ml·min^-1，7-羥基-4'-甲氧基黃烷的保留時間為35.8min，紫檀茋的保留時間為41.7min，通過變換波長法，測定7-羥基-4'-甲氧基黃烷的檢測波長為：280nm，測定紫檀茋的檢測波長為:306nm。

本發明的第四優選技術方案為：步驟（1）中的有機溶劑選自丙酮、氯仿、乙酸乙酯或甲醇，優選為氯仿。

本發明的第五優選技術方案為：步驟（1）中的回流時間為1小時。

本發明的第六優選技術方案為：劍葉龍血樹總黃酮的制備方法為：

（1）取劍葉龍血樹，粉碎成粗粉；

（2）加含O.2‰～0.7‰氫氧化鈉的25～75％乙醇回流提取二次，每次加4～14倍量，每次O.5～2小時，濾過，濾液合并；

（3）回收步驟（2）中的溶劑后加5～20％的鹽酸調節pH值為1～3，放置6～18小時，濾過；

（4）沉淀加水洗滌至中性，干燥，加醋酸乙酯回流提取二次，每次加3～12倍量，每次0．5～2小時，濾過，濾液合并，

（5）回收步驟（4）中有機溶劑，提取液減壓濃縮至相對密度在80℃下為1.1～l.6的稠膏，85℃以下干燥，粉碎，過篩，得到劍葉龍血樹總黃酮。

下面對本發明的技術方案做進一步的解釋和說明。

鑒于7-羥基-4'-甲氧基黃烷和紫檀茋二者已知的顯著活性，采用7-羥基-4'-甲氧基黃烷和紫檀茋兩類低極性成分，作為對劍葉龍血樹的龍血樹檢測指標，從而全面評價其質量是十分必要的。本發明通過系統的質量控制方法學研究，采用變換波長法，建立了HPLC法同步測定這兩個不同類別代表性成分的含量測定方法，為全面評價原藥材劍葉龍血樹及相關提取物質量提供參考。

本發明所提供的方法具有如下優點：

本發明通過色譜條件優化，應用變換波長檢測HPLC法同步測定其中兩個低極性不同類別藥效成分，實現了一條快速經濟，重現性好的質量檢測方法，對實現藥材及提取物全面質量控制有重要意義。

附圖說明：

圖1：254nm檢視三個不同體系下7-羥基-4'-甲氧基黃烷TLC純度檢驗；

圖2：可見光下檢視經10%H₂SO₄乙醇溶液顯色后照片；

圖3：7-羥基-4'-甲氧基黃烷純度檢驗的紫外吸收光譜圖；

圖4：7-羥基-4'-甲氧基黃烷純度檢驗的高效液相色譜圖；