[發明專利]一種檢測芳香植物鮮花含油量的方法

有效

• 申請號: 201210570947.7
• 申請日: 2012-12-24
• 公開（公告）號: CN103018226A
• 公開（公告）日: 2013-04-03
• 發明（設計）人: 汪志平;馬麗芳;于金鑫;劉新穎
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 杭州中成專利事務所有限公司 33212
• 代理人: 周世駿

技術領域

本發明涉及芳香植物育種與產品深加工技術，特別涉及芳香植物含油量的檢測方法。

背景技術

芳香植物也稱香料植物、芳香花草或香草，大部分生長在溫暖地區，具有香味，部分和全部可用在料理、茶飲、花藝、工藝、保健、香料、染色及藥用和造園等方面的多功能植物。據不完全統計，世界上芳香植物有80多個科3600多種，?而迄今為止被有效開發利用的只有400多種；我國已發現有開發利用價值的香料植物種類有60多科400多種，其中進行批量生產的天然香料品種已達100多種。薰衣草、代代、梔子、桂花樹和中國水仙等絕大多數芳香植物的芳香物質都存在于它的鮮花中，且這些芳香物質的主要成分為油脂，這也是芳香植物中具開發利用價值的主要生物活性成分，因其含量少而珍貴，故通常稱其為“精油”[陳金秀.?福建省芳香植物資源的分布及開發利用的對策.?福建輕紡.?2004,?177(2):?7-14]。因此，培育精油含量高的芳香植物新品種、建立高得率的精油提取技術工藝，是當前國內外芳香植物鮮花精油領域研發的熱點之一。但值得指出的是，當前測定芳香植物鮮花精油含量仍沿用傳統方法，即將5~10公斤鮮花用水蒸氣蒸餾，餾出液通過油水分離器分離獲得精油餾分并稱量，進而計算測得鮮花中精油的含量[單銀花等,?芳香植物鮮花精油提取與純化工藝研究進展.?精細與專用化學品.?2008,?16:?15-17]。這種方法因原料用量大、耗時費力，而難以滿足以高產精油的芳香植物新品種選育及高效提取技術工藝研制的實際需求。因此，迫切需要建立一種快速、微量測定芳香植物鮮花精油含量的方法。

發明內容

本發明要解決的技術問題是，克服現有技術中的不足，提供一種快速檢測芳香植物鮮花中精油含量的微量方法。

為解決技術問題，本發明的解決方案是：

提供一種檢測芳香植物鮮花精油含量的方法：先用液氮和石英沙將芳香植物鮮花充分研細，加入蒸餾水和二甲基亞砜（DMSO）后進行超聲處理及加熱回流，使芳香植物鮮花中的精油充分抽提至二甲基亞砜水溶液中，再通過蒸餾方式將精油分離出來，獲得精油與蒸餾水的混合液，并加入二甲基亞砜使其與精油互溶；利用尼羅紅能與芳香植物鮮花精油結合并發出特異波長熒光的特性，在含精油的二甲基亞砜水溶液中加入足量的尼羅紅，于490?nm光子激發下檢測450～700?nm的熒光發射光譜，并獲得被測芳香植物鮮花精油-尼羅紅產物的特征峰（λ_C）及其熒光發射光強度（I）；將所得結果與空白樣本進行比較后，再與油脂標準品——三油酸甘油酯的熒光發射光強度曲線進行比較，通過對應的光強度值得到被測芳香植物鮮花樣品中精油含量。

本發明具體包括以下步驟：

（1）稱取5～10?g芳香植物鮮花放入陶瓷研缽中，加入石英沙和液氮，并用研杵將芳香植物鮮花研磨成細泥；

（2）將芳香植物鮮花細泥轉至圓底離心管中，加入10?ml蒸餾水和1?ml二甲基亞砜并混勻；在冰浴條件下以超聲波處理60?s；

（3）將超聲波處理后的樣品轉至圓底蒸餾燒瓶中，加入15?ml蒸餾水并搖勻后安裝至冷凝回流器上；置100℃水浴中冷凝回流2?h后，停止加熱繼續通冷卻水，使系統冷卻至室溫；

（4）?卸下帶試樣的圓底蒸餾燒瓶，將其安裝到具冷凝管的蒸餾提取器上，置100℃水浴中蒸餾，冷凝管通冷卻水，用25?ml容量瓶收集餾分，當餾分達20?ml時，停止蒸餾；

（5）在制得的餾分中依次加入二甲基亞砜1?ml和25?μg/mL的尼羅紅溶液1?ml，并用蒸餾水定容至25?ml，充分混勻后于黑暗中40℃染色10?min，再利用熒光分光光度計于490?nm光子激發下檢測450-700?nm的熒光發射光譜，并獲得被測芳香植物鮮花精油-尼羅紅產物的特征峰（λ_C）及其熒光發射光強度（I）；

同時，在20?ml蒸餾水中依次加入二甲基亞砜1?ml和25?μg/mL的尼羅紅溶液1?ml，并用蒸餾水定容至25?ml，充分混勻后于黑暗中40℃染色10?min，進而利用熒光分光光度計于490?nm光子激發下檢測特征波長λ_C處的熒光發射光強度（I_B），以此為對照；

待測芳香植物鮮花中精油的相對熒光強度值I_S=I-I_B；