[發明專利]一種利用動物乳腺生產人血清白蛋白的方法及其表達載體在審
| 申請號: | 201210567600.7 | 申請日: | 2012-12-24 |
| 公開(公告)號: | CN103898157A | 公開(公告)日: | 2014-07-02 |
| 發明(設計)人: | 曾溢滔;曾凡一;蔡勤;方彧聃;黃淑幀 | 申請(專利權)人: | 上海市兒童醫院;上海滔滔轉基因工程股份有限公司 |
| 主分類號: | C12N15/85 | 分類號: | C12N15/85;C12N15/14;C07K14/765 |
| 代理公司: | 上海智信專利代理有限公司 31002 | 代理人: | 薛琦;沈利 |
| 地址: | 200040 上海*** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 利用 動物 乳腺 生產 血清 白蛋白 方法 及其 表達 載體 | ||
1.一種利用轉基因動物的乳腺組織生產人血清白蛋白的方法,包括利用含有人血清白蛋白基因表達盒的載體將人血清白蛋白基因表達盒轉入哺乳動物基因組中獲得轉基因動物,使該轉基因動物分泌乳汁,從乳汁中獲得人血清白蛋白,所述的人血清白蛋白基因表達盒從5’到3’依次包括啟動子、人血清白蛋白基因和終止子,其特征在于,所述的人血清白蛋白基因表達盒還包括人血清白蛋白基因3’旁側序列M2和β-酪蛋白基因的3’旁側序列B3中的一種或兩種,M2或B3在人血清白蛋白基因表達盒中位于終止子之后,M2的序列如Genebank數據庫中的序列AC108157.3的第86983位到第93655位所示,B3的序列如Genebank數據庫中的序列AY154895.1的第15803位到第21170位所示,所述的哺乳動物是小鼠。
2.如權利要求1所述的方法,其特征在于,所述的啟動子是山羊β-酪蛋白基因啟動子。
3.如權利要求1所述的方法,其特征在于,所述的人血清白蛋白基因是人血清白蛋白的編碼序列或者是含有內含子I的人血清白蛋白的編碼序列。
4.如權利要求1所述的方法,其特征在于,所述的含有人血清白蛋白基因表達盒的載體是真核表達載體pcDNA3.1(-)。
5.一種用于制備轉基因哺乳動物使其乳腺組織高表達人血清白蛋白的載體,其含有人血清白蛋白基因表達盒,所述的人血清白蛋白基因表達盒從5’到3’依次包括啟動子、人血清白蛋白基因和終止子,其特征在于,所述的人血清白蛋白基因表達盒還包括人血清白蛋白基因3’旁側序列M2和β-酪蛋白基因的3’旁側序列B3中的一種或兩種,M2或B3在人血清白蛋白基因表達盒中位于終止子之后,M2的序列如Genebank數據庫中的序列AC108157.3的第86983位到第93655位所示,B3的序列如Genebank數據庫中的序列AY154895.1的第15803位到第21170位所示。
6.如權利要求5所述的載體,其特征在于,所述的啟動子是β-酪蛋白基因啟動子。
7.如權利要求5所述的載體,其特征在于,所述的人血清白蛋白基因是人血清白蛋白的編碼序列或者是含有內含子I的人血清白蛋白的編碼序列。
8.如權利要求5所述的載體,其特征在于,所述的含有人血清白蛋白基因表達盒的載體是真核表達載體pcDNA3.1(-)。
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