[發(fā)明專(zhuān)利]一種生產(chǎn)7-木糖-10-去乙酰紫杉醇的方法及其專(zhuān)用培養(yǎng)基

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210566819.5
• 申請(qǐng)日: 2012-12-24
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103013903A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-04-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊凌;侯琨;欒宏偉
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所
• 主分類(lèi)號(hào): C12N5/04
• 分類(lèi)號(hào): C12N5/04;C07H17/04;C07H1/08
• 代理公司: 沈陽(yáng)晨創(chuàng)科技專(zhuān)利代理有限責(zé)任公司 21001
• 代理人: 張晨

1.一種基本培養(yǎng)基，其特征在于：該培養(yǎng)基的配方為：NH₄NO₃?1100-1300mg，KNO₃?1800-2000mg，KH₂PO₄?320-360mg，CaCl₂·2H₂O?420-460mg，MgSO₄·7H₂O?350-380mg，F(xiàn)eSO₄·7H₂O?26-29mg，Na₂-EDTA?36-38mg，MnSO₄·4H₂O?2.0-2.5mg，H₃BO₃?0.5-0.7mg，KI?0.7-0.9mg，Na₂MoO₄·2H₂O?0.02-0.03mg，CuSO₄·5H₂O?0.002-0.003mg，CoCl₂·6H₂O?0.002-0.003mg,Zn·Na-EDTA?12-17mg，鹽酸硫胺素0.4-0.6mg，煙酸0.4-0.6mg，鹽酸吡哆醇0.4-0.6mg，甘氨酸1-3mg，用水定容至1L，pH5.6-5.8。

2.利用權(quán)利要求1所述培養(yǎng)基生產(chǎn)7-木糖-10-去乙酰紫杉醇的方法，其特征在于：該方法步驟如下：

1）無(wú)菌條件下，將紅豆杉的外植體在體積百分濃度70%的乙醇中消毒30s，再將其置于質(zhì)量百分濃度為10%的次氯酸鈉中殺菌20min，用無(wú)菌水沖洗3次，接種前將外植體切成長(zhǎng)度為5mm的小段，將其接種于愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基中在24℃，黑暗條件下誘導(dǎo)愈傷組織；

2）將愈傷組織接種于繼代培養(yǎng)基中在24℃，黑暗條件下進(jìn)行繼代培養(yǎng)。

3.按照權(quán)利要求2所述生產(chǎn)7-木糖-10-去乙酰紫杉醇的方法，其特征在于：所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基為在權(quán)利要求1所述的基本培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加2,4-D?1-7mg，蔗糖20-50g，瓊脂5-8g/L。

4.按照權(quán)利要求2所述生產(chǎn)7-木糖-10-去乙酰紫杉醇的方法，其特征在于：所述繼代培養(yǎng)基為在權(quán)利要求1所述的基本培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加2,4-D?1-5mg，蔗糖20-50g，瓊脂5-8g/L。

5.按照權(quán)利要求2所述生產(chǎn)7-木糖-10-去乙酰紫杉醇的方法，其特征在于：所述紅豆杉為南方紅豆杉、云南紅豆杉或中華紅豆杉。

6.按照權(quán)利要求2所述生產(chǎn)7-木糖-10-去乙酰紫杉醇的方法，其特征在于：所述外植體為莖、針葉或雄花。

7.按照權(quán)利要求2所述生產(chǎn)7-木糖-10-去乙酰紫杉醇的方法，其特征在于：所述步驟2）中的繼代培養(yǎng)周期為3-4周，至少繼代4次。