[發(fā)明專利]核酸等溫?cái)U(kuò)增系列新方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210566754.4
• 申請(qǐng)日: 2012-12-25
• 公開（公告）號(hào): CN103834720A
• 公開（公告）日: 2014-06-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 曲海濤;王德國;張文超
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 哈爾濱德歌生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/68
• 分類號(hào): C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.說明書中所述核酸擴(kuò)增引物設(shè)計(jì)核心結(jié)構(gòu)，其中F₀引物是變值，F(xiàn)₀可以是從0值（即沒有F₀）到一定長度的任意引物片段，每個(gè)F₀取值都是獨(dú)立的，他們可取同值也可取不同值。

2.由權(quán)利1要求保護(hù)核酸擴(kuò)增引物設(shè)計(jì)核心結(jié)構(gòu)的中的所有變化結(jié)構(gòu)，包括但不限于說明書中舉例，包括PCR引物結(jié)構(gòu)應(yīng)用于核酸等溫?cái)U(kuò)增，包括在PCR結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上加入任何引物結(jié)構(gòu)（已申報(bào)專利的除外），F(xiàn)₀取值同上。

3.核心結(jié)構(gòu)的變通形式，引物設(shè)計(jì)核心結(jié)構(gòu)已是擴(kuò)增反應(yīng)的充分條件，因此無論在引物設(shè)計(jì)核心結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上加入幾個(gè)引物（包括加入任何引物結(jié)構(gòu)）均在此專利包括范圍，由于F₀取任意值（從0值到一定長度的任意引物片段），引物設(shè)計(jì)可以從兩個(gè)區(qū)到更多的區(qū)，所以我們的引物設(shè)計(jì)結(jié)構(gòu)可以演化成兩個(gè)區(qū)到更多的區(qū)可以進(jìn)行等溫?cái)U(kuò)增的任何引物設(shè)計(jì)結(jié)構(gòu)，也就是核酸擴(kuò)增引物設(shè)計(jì)在兩個(gè)區(qū)到更多的區(qū)只要能進(jìn)行等溫?cái)U(kuò)增的引物設(shè)計(jì)結(jié)構(gòu)都在我們專利保護(hù)范圍（已申報(bào)專利的除外）。

4.不限于保護(hù)說明書中提及的所有引物設(shè)計(jì)結(jié)構(gòu)，包括在這些結(jié)構(gòu)上加入任何引物結(jié)構(gòu)（已申報(bào)專利的除外）。

5.核心的引物設(shè)計(jì)結(jié)構(gòu)，也就是：只要引物設(shè)計(jì)存在我們的引物設(shè)計(jì)核心結(jié)構(gòu)，就在我們的專利保護(hù)范圍（已申報(bào)專利的除外），其中F₀引物是變值（可以從0值（即沒有F₀）到一定長度的任意引物片段），每個(gè)F₀取值都是獨(dú)立的，他們可取同值也可取不同值。

6.結(jié)構(gòu)中F₀引物是變值，但不能引起引物二聚體的可以從0值（即沒有F₀）到一定長度的任意引物片段，F(xiàn)₀當(dāng)然也可以設(shè)計(jì)成目標(biāo)反應(yīng)區(qū)域DNA分子片段上的部分鏈。

7.為盡快形成后續(xù)持續(xù)反應(yīng)的雙鏈以免形成二聚體前尚未形成雙鏈，引物設(shè)計(jì)最好不要相隔過多的堿基，這樣反應(yīng)慢很難形成后續(xù)反應(yīng)為基礎(chǔ)的有效雙鏈，因此最好調(diào)近對(duì)向引物之間的間距（最小間距可以是相臨，但絕不能交叉）。

8.引物設(shè)計(jì)結(jié)構(gòu)不僅可以應(yīng)用于（DNA、RNA）定性、定量檢測，還可以應(yīng)用于一管式檢測基因突變等，僅在舉例中說明一例（基因突變檢測具體在后續(xù)專利中說明）。

9.無論我們個(gè)別結(jié)構(gòu)反應(yīng)機(jī)理表述是否正確，但只要它能持續(xù)反應(yīng)，我們的引物設(shè)計(jì)結(jié)構(gòu)就是可行的。

10.核酸擴(kuò)增反應(yīng)中的引物設(shè)計(jì)結(jié)構(gòu)，也可以表述成核酸合成的結(jié)構(gòu)原理，有關(guān)于其中具體引物設(shè)計(jì)應(yīng)把握的一些原則，不在本專利的考慮范圍，只在說明書中以結(jié)核檢測舉其中幾例。

11.本專利中未規(guī)定用何種酶，無論用何種酶，也沒有規(guī)定反應(yīng)溫度，無論何種溫度（等溫或變溫），也就是我們保護(hù)的引物設(shè)計(jì)結(jié)構(gòu)不僅應(yīng)用于核酸等溫?cái)U(kuò)增是我們的保護(hù)范圍，我們的引物設(shè)計(jì)結(jié)構(gòu)應(yīng)用與其它擴(kuò)增方式（PCR等任何擴(kuò)增方式）也在我們的保護(hù)范圍（在對(duì)應(yīng)領(lǐng)域已申報(bào)專利的除外）。