[發(fā)明專利]雙齒圍沙蠶β-1,4-內(nèi)切葡聚糖酶基因序列及其克隆方法無效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201210562478.4 | 申請(qǐng)日： | 2012-12-21 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN103882040A | 公開（公告）日： | 2014-06-25 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 張倩茹;牟文燕;魏樹和;周啟星 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 中國科學(xué)院沈陽應(yīng)用生態(tài)研究所 |
| 主分類號(hào)： | C12N15/56 | 分類號(hào)： | C12N15/56;C12N9/42;C12N15/10 |
| 代理公司： | 沈陽科苑專利商標(biāo)代理有限公司 21002 | 代理人： | 周秀梅;李穎 |
| 地址： | 110164 遼寧省*** | 國省代碼： | 遼寧;21 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 雙齒圍沙蠶 內(nèi)切葡 聚糖 基因 序列 及其 克隆 方法 | ||
1.一種雙齒圍沙蠶β-1,4-內(nèi)切葡聚糖酶基因序列，其特征在于：雙齒圍沙蠶β-1,4-內(nèi)切葡聚糖酶基因序列為SEQ?ID?NO.1中核苷酸序列所示。
2.一種權(quán)利要求1所述的雙齒圍沙蠶β-1,4-內(nèi)切葡聚糖酶基因序列編碼蛋白，其特征在于：雙齒圍沙蠶β-1,4-內(nèi)切葡聚糖酶基因序列編碼蛋白為SEQ?ID?NO.2中氨基酸序列所示。
3.一種權(quán)利要求1所述的雙齒圍沙蠶β-1,4-內(nèi)切葡聚糖酶基因序列的克隆方法，其特征在于：首先從雙齒圍沙蠶組織中提取總RNA；而后采用下游外側(cè)特異性引物EG-Outer-R（5′-TTCCTGTCTGCTCCATATCC-3′）和下游內(nèi)側(cè)特異性引物EG-Inner-R（5′-GTTAGGTCCTGGCCATTGTT-3′）進(jìn)行5’-RACE反應(yīng)，克隆得到β-1,4-內(nèi)切葡聚糖酶基因5’端序列；再利用反向引物EG-F進(jìn)行RT-PCR反應(yīng)，克隆得到β-1,4-內(nèi)切葡聚糖酶基因3’端序列，反向引物EG-F:5′-AACAGACCTGCTTGGAGCAT-3′；通過序列片段拼接矯正，最終獲得β-1,4-內(nèi)切葡聚糖酶基因核苷酸序列SEQ?ID?NO.1。
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