[發(fā)明專利]一種經(jīng)酸水解研究藍莓果化學組分的方法

無效

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• 申請日: 2012-12-21
• 公開（公告）號: CN102998397A
• 公開（公告）日: 2013-03-27
• 發(fā)明（設計）人: 呂兆林;張柏林;侯智霞;潘月;雷美玲;任璇;郭弘璇;林西
• 申請（專利權）人: 北京林業(yè)大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發(fā)明涉及一種藍莓果化學組分研究的方法，尤其是涉及一種藍莓果化學組分提取物經(jīng)水解后采用氣相色譜質譜聯(lián)用(GC-MS)柱前衍生化法研究其組分的方法。

背景技術

藍莓是世界糧農組織推薦的五大健康水果之一，具有很強的抗氧化能力；能夠預防高血壓、高血脂及肥胖，特別是對眼睛的健康有特別的好處。藍莓中含有豐富的多酚類、黃酮類以及多糖類物質，特別是其中的花青素具有促進視力的功效，是提供藍莓保健功效的重要因子。

對藍莓果的化學組分的研究是合理利用藍莓資源的基礎。近年來，藍莓果實中的化學組分的結構鑒定引起了越來越多研究者的廣泛興趣。到目前為止，研究者多數(shù)使用液相色譜質譜聯(lián)用儀(HPLC-MS)為研究手段，少量研究者用核磁共振儀(NMR)研究其化學組分結構。氣相色譜質譜聯(lián)用儀(GC-MS)是另一種廣譜的化學組分研究手段，具有線性范圍寬、靈敏度高、使用成本低、應用廣泛的特點，而迄今尚未有相關手段研究藍莓化學組分的報道。為了更全面細致地研究藍莓果化學組分，需嘗試開發(fā)一種GC-MS研究其化學組分的快捷、簡便、經(jīng)濟、實用的新方法。

本研究以采用高效、快捷、簡便、經(jīng)濟的手段研究藍莓果化學組分為研究目標，將藍莓果化學組分提取物經(jīng)水解后采用GC-MS柱前衍生化法研究其組分，為全面細致地研究藍莓果化學組分提供工藝參數(shù)，為合理利用生物量豐富的藍莓資源提供指導。

發(fā)明內容

本發(fā)明旨在以我國資源十分豐富的藍莓果為原料，開發(fā)一種將藍莓果化學組分提取物經(jīng)水解后采用GC-MS柱前衍生化法研究其組分的簡便、經(jīng)濟、實用的新方法。

一種將藍莓果化學組分提取物經(jīng)水解后采用GC-MS柱前衍生化法研究其組分的方法，其流程示意圖見圖1，其特征在于；

1)制備藍莓果化學組分提取液

將藍莓鮮果用榨汁機研磨，得到藍莓果泥，準確稱量藍莓果泥5g左右，用不同體系不同配比的有機溶液作為提取液浸沒果泥，室溫浸提2小時，1500rpm離心10分鐘，取上清液，該上清液為藍莓果化學組分提取液，其中所述不同體系不同配比的有機溶液的體積為100-200mL，所述的不同體系不同配比的有機溶液有四種，第一種為含甲酸的甲醇溶液，所述的甲醇溶液中含甲酸的體積百分比為0.1-1％；第二種為甲醇溶液，所述的甲醇溶液的體積濃度(V/V)為30％-60％；第三種為丙酮溶液，所述的丙酮溶液的體積濃度(V/V)為40％-70％；第四種為乙醇溶液，所述的乙醇溶液的體積濃度(V/V)為30％-60％；

(2)提取物水解

準確量取上述藍莓果化學組分提取液0.5mL，置于5mL磨口玻璃離心管中，加入0.5mL三氟乙酸溶液，80-120℃保溫1-3小時，取出離心管，冷卻至室溫，1000rpm離心4分鐘，將上層清液移至100mL雞心瓶中，減壓蒸餾，得到透亮紫紅色的貼壁物，將此貼壁物用1mL甲醇溶解，得到水解物溶液，所述的三氟乙酸溶液的濃度為4moL/L，所述減壓蒸餾的水浴溫度45度，真空度為0.09Mpa；

(3)水解物衍生化

將1mL水解物溶液置于離心中，用氮吹儀吹干，再加入0.1-1mL?BSTFA衍生化試劑，放入烘箱中，60-100℃保溫1h，取出后冷卻至室溫，得到衍生化溶液；

(4)GCMS儀測試衍生化溶液

設置GCMS儀器條件，測試衍生化溶液，得到衍生化溶液總離子流圖、各峰所對應的化合物質譜圖等數(shù)據(jù)信息，所述的GCMS儀器條件為Rtx-5石英毛細管柱，進樣口溫度280℃，分流比10∶1，程序升溫，接口溫度250℃，進樣量1微升，所述的程序升溫程序為柱初溫100℃，升溫速率6℃/min，升至250℃，繼續(xù)升溫，速率15℃/min，升至280℃，保持時間20min；

(5)獲得藍莓果化合物組分信息

利用得到衍生化溶液數(shù)據(jù)信息，利用圖譜庫檢索和人工圖譜解析確定化合物結構。

附圖說明

圖1.藍莓果化學組分提取物經(jīng)水解后采用GC-MS柱前衍生化法研究其組分的流程示意圖

圖2.0.1％甲酸的甲醇溶液提取物經(jīng)水解及衍生化后的GC-MS總離子流圖

圖3.30％甲醇溶液提取物經(jīng)水解衍生化后的GC-MS總離子流圖

圖4.丙酮∶水∶乙酸溶液提取物經(jīng)水解衍生化后的GC-MS總離子流圖

圖5.50％乙醇溶液提取物經(jīng)水解衍生化后的GC-MS總離子流圖

具體實施方式

以下，關于本發(fā)明的一種藍莓果化學組分研究的方法，基于實施方式進行說明。