[發明專利]一種二甲四氯除草劑降解菌SE08及其篩選方法和應用無效
| 申請號： | 201210558681.4 | 申請日： | 2012-12-20 |
| 公開（公告）號： | CN103173377A | 公開（公告）日： | 2013-06-26 |
| 發明（設計）人： | 譚琳;曾維愛;鄭雄志;周志成;李宏光;胡秋龍;譚濟才;江紫薇 | 申請（專利權）人： | 湖南農業大學;湖南省煙草公司郴州市公司 |
| 主分類號： | C12N1/20 | 分類號： | C12N1/20;C12N1/02;B09C1/10;C02F3/34;C12R1/01;C02F101/36 |
| 代理公司： | 杭州華知專利事務所 33235 | 代理人： | 寧岡 |
| 地址： | 410128 *** | 國省代碼： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 二甲 除草劑 降解 se08 及其 篩選 方法 應用 | ||
1.一種二甲四氯除草劑降解菌SE08，其特征在于，該降解菌為腸桿菌(Enterobacter?sp.)，保藏編號為CGMCC?No.7016，保藏日期：2012.12.18，保藏在中國微生物菌種保藏委員會普通微生物中心。?
2.根據權利要求1所述的二甲四氯除草劑降解菌SE08，其特征在于，該菌株為革蘭氏陰性好氧菌，無芽孢無莢膜；在NA固體培養基上37℃培養24h，菌落的形狀為橢圓，邊緣整齊，表面光滑凸起，菌落為奶白色，不透明，體細胞呈短桿狀，長2.0~2.5μm，寬0.6~0.8μm；該菌株16S?rRNA序列全長1076bp，其核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1。?
3.根據權利要求2所述的二甲四氯除草劑降解菌SE08，其特征在于，所述NA固?
體培養基配方如下：牛肉膏3.0g，蛋白胨10.0g，氯化鈉5.0g，蒸餾水1L，瓊?
脂20.0g，調節pH7.0-7.4，121℃滅菌30min。?
4.一種權利要求1所述的二甲四氯除草劑降解菌SE08的篩選方法，其特征在于，該方法具體包括以下步驟：?
（1）取污染土樣10.0g于三角瓶中，加入100mL含50mg/L二甲四氯的無機鹽培養液，25~37℃下，150~220rpm振蕩培養5天；?
（2）取出10mL振蕩液加入到90mL含125mg/L二甲四氯的無機鹽培養液，在25~37℃，150~220rpm繼續振蕩培養5天，依次類推，提高二甲四氯濃度分別為250、500、750、1000mg/L，每隔5天，取出10mL培養液加入到90mL含梯度升高濃度的二甲四氯無機鹽培養液中，25~37℃下，150~220rpm繼續振蕩培養5天；?
（3）取1000mg/L二甲四氯無機鹽培養液中的培養物，加入到含有濃度為20g/L瓊脂的無機鹽培養基中進行稀釋涂布，30℃下培養5天；?
（4）挑取單菌落，然后在含250mg/L二甲四氯和20g/L瓊脂的無機鹽培養基上采用平板劃線法進行分離純化，獲得純化的以二甲四氯為唯一碳源和能量生長的菌株。?
5.根據權利要求4所述的二甲四氯除草劑降解菌SE08的篩選方法，其特征在于，?所述無機鹽培養液的配方如下：KH2PO40.5g，K2HPO40.5g，MgSO4·7H2O0.2g，CaC120.1g，NaC10.2g和1.0mL微量元素溶液，蒸餾水1000mL，調節pH為7.0，121℃滅菌30min。?
6.根據權利要求5所述的二甲四氯除草劑降解菌SE08的篩選方法，其特征在于，所述的微量元素溶液配方為：ZnCl270mg，MnCl2·4H2O100mg，HSbO360mg，CoCl2·6H2O200mg，NiCl2·H2O40mg，Na2MoO4·2H2O35mg，CuCl2·H2O20mg，CuSO4·5H2O30mg，37％的濃鹽酸0.9mL，蒸餾水1000mL。?
7.一種權利要求1所述的二甲四氯除草劑降解菌SE08在降解土壤或水中的二甲四氯的應用。?
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