[發明專利]雞腸道抗菌肽的提取方法

無效

• 申請號: 201210553288.6
• 申請日: 2012-12-19
• 公開（公告）號: CN103880917A
• 公開（公告）日: 2014-06-25
• 發明（設計）人: 張述智;夏偉;朱紹輝;張浩;王曉麗;徐權汗;李之詳;許團輝
• 申請（專利權）人: 青島中仁藥業有限公司
• 主分類號: C07K2/00
• 分類號: C07K2/00;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/16
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種雞腸道抗菌肽的提取方法，其特征在于：它包括如下具體步驟：

一、取腸黏膜和菌株：取某雞場飼養的60日齡三黃雞的雞腸黏膜、大腸桿菌菌株；

二、抗菌肽粗制品的制備：取新鮮雞腸黏膜用滅菌生理鹽水沖洗，經組織搗碎機搗碎后按1：1比例加入5%乙酸，100℃水浴10min，迅速冷卻后4℃、8000r/min離心30min，取上清超聲波裂解30s，4℃攪拌浸提24h后重復上述離心過程，取上清，調整pH7.0值，再次離心，上清液冷凍干燥；

三、抗菌肽粗制品的純化：將上清液上樣于SephadexG-50過濾層析柱，用0.1mol/L乙酸鈉溶液，pH7.0進行洗脫，恒流泵的速度為3×1，紫外檢測儀檢測其在280nm處的吸光值，記錄儀記錄，量程200mV，紙速度為6cm/h，自動部分收集器收集，每管約2ml，檢測各收集管洗脫液對大腸桿菌的抑菌活性，收集有抑菌作用的洗脫液，用截留分子量為l0KD的超濾離心管于5000g條件下離心30min，有抑菌活性的濾過過濾層析與超濾離心，將上清液上樣于SephadexG-50過濾層析柱，用0.1mol/L乙酸鈉溶液，pH7.0進行洗脫，物冷凍干燥，-20℃保存。