[發明專利]6條寡核苷酸序列及其應用

無效

• 申請號: 201210552569.X
• 申請日: 2012-12-17
• 公開（公告）號: CN103060326A
• 公開（公告）日: 2013-04-24
• 發明（設計）人: 鄭江;湯學敏;李玉寶
• 申請（專利權）人: 集美大學
• 主分類號: C12N15/115
• 分類號: C12N15/115;C12N15/10;C12Q1/68;C12Q1/04
• 代理公司: 廈門南強之路專利事務所 35200
• 代理人: 馬應森

1.6條寡核苷酸序列，其特征在于包括SEQ?ID?No.1、SEQ?ID?No.2、SEQ?ID?No.3、SEQID?No.4、SEQ?ID?No.5和SEQ?ID?No.6共6條寡核苷酸序列，且采用其中一條就能完成滅活溶藻弧菌的識別檢測；

所述SEQ?ID?No.1可記為“#7適配子”，所述SEQ?ID?No.2可記為“#14適配子”，所述SEQ?ID?No.3可記為“#23適配子”，所述SEQ?ID?No.4可記為“#4適配子”，所述SEQ?ID?No.5可記為“#8適配子”，所述SEQ?ID?No.6可記為“#9適配子”；

所述SEQ??ID??No.1為：5′-TCA??GTC??GCT??TCG??CCG??TCT??CCT??TC

GGGGGCGCGGTGAGGGGCTGCACAAGAGGGAG?GCA?CAA?GAG?GGA?GAC?CCC?AGAGGG-3′；

所述SEQ??ID??No.2為：5′-TCA??GTC??GCT??TCG??CCG??TCT??CCT??TCGGACGAGATGGGCGGGAAACGAGGCACAAGAGGGA?GCA?CAA?GAG?GGA?GAC?CCCAGAGGG-3′；

所述SEQ??ID??No.3為：5′-TCA??GTC??GCT??TCG??CCG??TCT??CCT??TCGTAGGAGGTAGTCGGAGAGGCGAATGAGAGGGGAAGCACAAGAGGGA?GCA?CAA?GAGGGA?GAC?CCC?AGA?GGG-3′；

所述SEQ??ID??No.4為：5′-TCA??GTC??GCT??TCG??CCG??TCT??CCT??TCAGCCGGGGTGGTCAGTAGGAGCA??GCA?CAA?GAG?GGA?GAC?CCC?AGA?GGG-3′；

所述SEQ??ID??No.5為：5′-TCA??GTC??GCT??TCG??CCG??TCT??CCT??TCAGCCGGGGTGGTCAGTAGGAGCAGCACAAGAGGGA?GCA?CAA?GAG?GGA?GAC?CCCAGAGGG-3′；

所述SEQ??ID??No.6為：5′-TCA??GTC??GCT??TCG??CCG??TCT??CCT??TCTGCAGGGCCAGAACAGGGGGAAGGCACAAGAGGGA?GCA?CAA?GAG?GGA?GAC?CCCAGAGGG-3′。

2.如權利要求1所述6條寡核苷酸序列的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

1）合成用于篩選的ssDNA寡核苷酸文庫（5′-TCA?GTC?GCT?TCG?CCG?TCT?CCT?TC----N35----GCACAAGAG?GGAGAC?CCCAGAGGG-3′），其中N35為35個隨機寡核苷酸；

2）將寡核苷酸文庫與滅活溶藻弧菌混合后進行SELEX篩選，直到親和力不再明顯上升為止；

3）SELEX篩選完成后對適配子富集文庫進行克隆測序，選擇其中的高拷貝ssDNA進行親和特異性的驗證和親和常數的測定，獲得相應適配子。