[發明專利]一種雞新城疫、傳染性支氣管炎病毒同胚增殖的培養方法

有效

• 申請號: 201210545895.8
• 申請日: 2012-12-14
• 公開（公告）號: CN103013930A
• 公開（公告）日: 2013-04-03
• 發明（設計）人: 孟照潔;宮玉珍;楊靈芝
• 申請（專利權）人: 山東濱州沃華生物工程有限公司
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;C12N7/02
• 代理公司: 濟南舜源專利事務所有限公司 37205
• 代理人: 張建成

1.一種雞新城疫、傳染性支氣管炎病毒同胚增殖的培養方法，其特征在于培養方法及步驟如下：

（1）將新城疫毒種LaSota株毒種稀釋成10⁶EID₅₀，傳染性支氣管炎毒株M41株用PBS液稀釋成10³EID₅₀，稀釋后將兩種病毒液以1:1的比例混合;?

（2）將混合后毒種接種至11日齡易感雞胚尿囊內，每胚接種尿囊腔0.15ml，接種后用蠟封接種孔和氣孔；

（3）將接種后雞胚放到培養箱，在36.5℃下進行孵化；

（4）72小時前每24小時照胚一次，72小時后每6小時照胚一次，棄去72h前的死亡胚，留下72-96h時間段的死亡胚和96h的活胚，在2-8℃環境下冷卻12h，將冷卻的雞胚取出，放入收胚室，將蛋殼的氣室部位用碘酒消毒后，以無菌手術剝去氣室部位的蛋殼，將蛋殼膜，用尖頭小鑷子將絨毛尿囊膜及羊膜撕破，檢查胚液是否渾濁或有異物，如果沒有則抽取胚液，收集，即得雞新城疫、傳染性支氣管炎抗原。