[發明專利]一種鵝細小病毒H株及其在小鵝瘟防治中的應用

有效

• 申請號: 201210543550.9
• 申請日: 2012-12-14
• 公開（公告）號: CN103122336A
• 公開（公告）日: 2013-05-29
• 發明（設計）人: 藏玉婷;鄔立權;王彬;柴華;王琪;宋揚;王峰;劉洪斌;李尊江;涂映霞;胡瑞鴻;張楊;丁國杰
• 申請（專利權）人: 哈藥集團生物疫苗有限公司
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;A61K39/23;A61P31/20;C12R1/93
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識產權代理有限責任公司 11139
• 代理人: 孫皓晨;費碧華

1.一種鵝細小病毒H株，命名為GPV-H，其特征在于所述的鵝細小病毒H株保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏日期為2012年11月13日，保藏編號為CGMCC?NO.6851。

2.權利要求1所述的鵝細小病毒H株在制備預防小鵝瘟藥物中的應用。

3.一種小鵝瘟滅活疫苗，其特征在于有效成分為滅活后的鵝細小病毒H株，所述的鵝細小病毒H株保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC?NO.6851。

4.一種制備權利要求3所述的小鵝瘟滅活疫苗的方法，其特征在于包括以下步驟：將所述的鵝細小病毒H株進行培養，得到鵝細小病毒抗原液，將鵝細小病毒抗原液滅活、濃縮，分別配制油相和水相，將油相和水相混合后乳化，即得小鵝瘟滅活疫苗。

5.如權利要求4所述的方法，其特征在于所述的抗原液按照以下方法制備：

取所述的鵝細小病毒H株毒種，用滅菌生理鹽水稀釋至10^-3～10^-4，尿囊腔內接種12日齡無小鵝瘟抗體的鵝胚，0.2mL/胚，接種后密封針孔，置37℃孵育，不必翻蛋，雞胚接種后，每天照蛋2次，將72小時前死亡的鵝胚棄去；此后，每4～6小時照蛋1次，死亡的胚隨時取出，直至216小時，將72～216小時死亡鵝胚置于4℃冷卻4～24小時；用碘酊消毒氣室部位，然后以無菌方法剝除氣室部位卵殼，揭去卵殼膜，挑破絨毛尿囊膜及羊膜，吸取鵝胚尿囊液，即為抗原液。

6.如權利要求4所述的方法，其特征在于將得到的抗原液進行5倍濃縮。

7.如權利要求4所述的方法，其特征在于所述的油相按照以下方法制備：白油94份（以毫升為單位）、司本-80?6份（以毫升為單位），混合后加熱，加入硬脂酸鋁2份（以克為單位）混合均勻，即得油相。

8.如權利要求4所述的方法，其特征在于所述水相按照以下方法制備：吐溫-80?4份（以毫升為單位）、滅活濃縮后的病毒抗原液96份（以毫升為單位），混合均勻，即得水相。

9.如權利要求4所述的方法，其特征在于所述水相和油相按體積比為1：2混合，并加入1%（w/v）硫柳汞溶液，使得硫柳汞最終濃度為0.01%（w/v）。