[發明專利]檢測鄰苯二甲酸二丁酯的酶聯免疫試劑盒及其應用有效
| 申請號: | 201210541505.X | 申請日: | 2012-12-14 |
| 公開(公告)號: | CN103869070A | 公開(公告)日: | 2014-06-18 |
| 發明(設計)人: | 何方洋;萬宇平;馮才偉;孫震;楊昌松;李勇;崔廷婷;楊學林 | 申請(專利權)人: | 北京勤邦生物技術有限公司 |
| 主分類號: | G01N33/577 | 分類號: | G01N33/577;G01N33/544 |
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| 地址: | 102206 北京市昌平*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 檢測 鄰苯二 甲酸 二丁酯 免疫 試劑盒 及其 應用 | ||
1.一種檢測鄰苯二甲酸二丁酯的酶聯免疫試劑盒,其特征在于包括:包被有包被原的酶標板、鄰苯二甲酸二丁酯特異性抗體、酶標記物、鄰苯二甲酸二丁酯標準品溶液、底物顯色液、終止液、洗滌液、樣本稀釋液,所述包被原為鄰苯二甲酸二丁酯偶聯抗原,所述酶標記物為酶標記抗抗體。
2.如權利要求1所述的試劑盒,其特征在于所述鄰苯二甲酸二丁酯偶聯抗原是由鄰苯二甲酸二丁酯半抗原與載體蛋白偶聯得到,所述載體蛋白可為鼠血清蛋白、甲狀腺蛋白、牛血清白蛋白、兔血清蛋白、人血清蛋白、卵清蛋白、血藍蛋白或纖維蛋白原。
3.如權利要求2所述的試劑盒,其特征在于所述鄰苯二甲酸二丁酯半抗原是由鄰苯二甲酸酐與正丁醇、4-氨基丁酸反應得到,分子結構式為:
。
4.如權利要求1所述的試劑盒,其特征在于所述鄰苯二甲酸二丁酯特異性抗體是以鄰苯二甲酸二丁酯偶聯抗原作為免疫原制備獲得,所述鄰苯二甲酸二丁酯特異性抗體為鄰苯二甲酸二丁酯單克隆抗體或鄰苯二甲酸二丁酯多克隆抗體。
5.如權利要求1所述的試劑盒,其特征在于所述抗抗體為羊抗鼠抗抗體或羊抗兔抗抗體。
6.如權利要求1所述的試劑盒,其特征在于所述酶標記物的標記酶為辣根過氧化物酶或細菌提取堿性磷酸酯酶,當標記酶為辣根過氧化物酶時,底物顯色液A液為過氧化氫或過氧化脲,底物顯色液B液為鄰苯二胺或四甲基聯苯胺,終止液為1~2mol/L的硫酸或鹽酸緩沖液;當標記酶為細菌提取堿性磷酸酯酶時,底物顯色液為對硝基磷酸鹽緩沖液,終止液為1~2mol/L氫氧化鈉。
7.如權利要求1所述的試劑盒,其特征在于所述洗滌液為pH值為7.4,含有0.5%~1.0%吐溫-20、0.01‰~0.03‰疊氮化鈉防腐劑、0.1~0.3mol/L的磷酸鹽緩沖液;所述樣本稀釋液為pH值為7.0、0.1mol/L的磷酸鹽緩沖液,所述百分比為重量體積百分比。
8.如權利要求1所述的試劑盒,其特征在于所述鄰苯二甲酸二丁酯標準品溶液的濃度分別為0mg/L、0.02mg/L、0.06mg/L、0.18mg/L、0.54mg/L、1.62mg/L。
9.一種檢測樣品中鄰苯二甲酸二丁酯含量的方法,包括步驟:
(1)樣品前處理;
(2)用權利要求1~8任一項所述的試劑盒進行檢測;
(3)分析檢測結果。
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