[發明專利]一種生物活性多肽QEPV及其制備和應用

有效

• 申請號: 201210536588.3
• 申請日: 2012-12-12
• 公開（公告）號: CN103012552A
• 公開（公告）日: 2013-04-03
• 發明（設計）人: 張少輝;盧姍姍;馬鎏镠;孫冠華;崔磊;金贏凱;徐海紅
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: C07K5/103
• 分類號: C07K5/103;C07K1/20;C12N15/11;C12P21/02;C12P21/06;A23L1/29;A61K38/07;A61P39/06;A61P37/04;C12R1/225
• 代理公司: 上海光華專利事務所 31219
• 代理人: 許亦琳;余明偉

1.一種生物活性多肽，其氨基酸序列為Gln-Glu-Pro-Val。

2.編碼權利要求1所述生物活性多肽的核苷酸片段。

3.權利要求2所述的核苷酸片段，其特征在于，所述核苷酸片段的序列如SEQ?ID?NO：2所示。

4.權利要求1所述生物活性多肽的制備方法，步驟如下：

1）發酵：將瑞士乳桿菌添加到脫脂乳中進行厭氧發酵，獲得瑞士乳桿菌發酵乳；

2）多肽的粗提：對步驟1）的瑞士乳桿菌發酵乳進行低溫離心分離，取上清液；

3）多肽的純化：

a.對步驟2）的上清液進行超濾處理，收集濾液；

b.收集的濾液采用反向層析柱SOURSE?5RPC?ST進行反相高效液相色譜分離，收集生物活性多肽QEPVL；

4）多肽的消化：采用兩步酶解法酶解步驟3）的生物活性多肽QEPVL，獲得生物活性多肽QEPV；第一步酶解所采用的酶為胃蛋白酶，第二步酶解所采用的酶為胰酶。

5.如權利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟1）所述厭氧發酵的條件為：發酵溫度36～38℃，發酵時間15～20h。

6.如權利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟3）a所述超濾法所采用的濾膜的截留分子量分別為10kDa和3kDa；所述超濾過程中，壓力范圍為0.1～0.3MPa，濾液流速為0.8～1.2mL/min。

7.如權利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟4）所述兩步酶解法為:將生物活性多肽QEPVL溶于滅菌去離子水中，并加入胃蛋白酶，獲得反應液，調節反應液pH值為2.0±0.1，在37±0.5℃的恒溫水浴中保溫反應60～120min，獲得第一步酶解液；將第一步酶解液的pH值調整為7.5±0.1，并加入胰酶，于37±0.5℃的恒溫水浴中保溫反應120～180℃，獲得第二步酶解液；將第二步酶解液采用沸水浴法使酶失活，獲得酶解產物；酶解產物冷凍干燥獲得產品。

8.權利要求1所述生物活性多肽在制備抗氧化和/或增強機體免疫力的食品、保健品及藥物中的應用。

9.一種抗氧化藥物，包含前述生物活性多肽QEPV或前述生物活性多肽QEPV的衍生物。

10.一種增強機體免疫力藥物，包含前述生物活性多肽QEPV或前述生物活性多肽QEPV的衍生物。