[發明專利]一株植物乳桿菌及青貯用微生態制劑

有效

• 申請號: 201210534490.4
• 申請日: 2012-12-12
• 公開（公告）號: CN103060228A
• 公開（公告）日: 2013-04-24
• 發明（設計）人: 陶正國;洪梅;吳秀麗;孫丹丹
• 申請（專利權）人: 廣州立達爾生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23K3/03;C12R1/25
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 方振昌

技術領域

本發明屬于發酵微生物和青貯領域，特別涉及一株植物乳桿菌及青貯用微生態制劑。

背景技術

青貯是指在厭氧條件下，通過附生于植物上的乳酸菌利用原料中的可溶性碳水化合物，厭氧發酵產生有機酸（主要是乳酸），導致pH值降低，從而殺滅各種微生物或抑制其活性，達到保存青綠飼料的目的。根據對發酵效果的影響，可以將青貯添加劑分為四類：1）發酵促進型添加劑，主要包括乳酸菌、纖維素酶、葡萄糖、糖蜜；2）發酵抑制型添加劑，包括硫酸、鹽酸、甲酸、乙酸、甲醛等；3）營養型添加劑，包括尿素、氨、乳糖、礦物質等；4）好氣性腐敗菌抑制劑，如丙酸、山梨酸、丙烯酸等。

發酵促進型添加劑和發酵抑制型添加劑都是控制發酵程度的，但前者的作用是促進乳酸發酵，即通過增強乳酸菌的活動，促進乳酸的生成，從而使青貯飼料的pH值迅速下降。其中含碳水化合物豐富的物質如葡萄糖、谷類、糖蜜、蔗糖等加入到缺乏可溶性糖的青貯作物中，如豆科牧草等，非常常見。而纖維素酶的作用表現在兩個方面：一是可使纖維素分解產生葡萄糖，為乳酸菌發酵提供更多的底物；二是加速細胞壁的降解，增加營養成分的含量。據趙長友等（1994）研究，纖維素酶中含有氧化還原酶成分，可以消耗氧氣，從而更容易創造厭氧環境。Selmer-olsen等（1994）報道，在三葉草為主的牧草中，加入纖維素酶和半纖維素酶，加酶后青貯料達到低pH值更快一些，最終的pH值更低一些，認為對于含糖低的作物效果更加明顯。

發酵抑制性添加劑的作用是部分或者全部抑制微生物的生長；營養型添加劑則是在制作青貯時加到原料中，旨在改善青貯飼料的營養價值；好氣性腐敗菌抑制劑主要在青貯初期發揮作用，減少青貯腐敗的發生。

目前萬壽菊是提取葉黃素的主要原料，其產品屬于天然色素，無毒無害。天然葉黃素具有抗氧化、預防視網膜黃復病和盲眼病、預防癌癥和心血管疾病等生理功效。此外，葉黃素具有顯著的著色功能，因此被廣泛應用于食品、醫藥以及飼料添加劑等領域，市場前景廣闊。

萬壽菊花制備葉黃素的傳統生產方法是收獲萬壽菊花后，青貯、壓榨、烘干并制粒、正己烷提取和濃縮，然后得到葉黃素浸膏。在上述過程中，萬壽菊花的青貯是必不可少的前處理過程，其作用主要是有效保護萬壽菊鮮花色素含量，降解植物細胞壁，分離鮮花中阻礙提取的成分，使色素更易被萃取，提高提取效率。有研究顯示，在萬壽菊前處理，即青貯和烘干階段約損失20%~40%的葉黃素。因此，如何有效減少過程中葉黃素的損失，成為萬壽菊花葉黃素深加工中的不可忽視的關鍵技術之一。

我國應用青貯飼料已經有多年的歷史，為了減少青貯發酵過程中的營養物質的損失和提高青貯飼料的品質，人們通過多種途徑并使用了不同類型的青貯飼料添加劑，相關試驗研究取得了很大成就。需要注意的是，無論是添加劑青貯還是混合青貯，大多數的研究都是針對玉米、紫花苜蓿等常見飼料原料，而關于萬壽菊青貯的研究少之又少，專門用于萬壽菊青貯的微生態制劑產品種類不多。

發明內容

本發明的目的在于提供一株植物乳桿菌（Lactobacillus?plantarum）Lder01。

本發明的另一個目的在于提供上述菌株在青貯中的應用。?

本發明的再一個目的在于提供一種青貯用微生態制劑。

本發明所采取的技術方案是：

一株植物乳桿菌Lder01，保藏在中國典型培養物保藏中心，其保藏號為CCTCC?M2012461。

一種青貯用微生態制劑，含有植物乳桿菌Lder01。

一種青貯用微生態制劑的制備方法，包括以下步驟：

1)??將植物乳桿菌Lder01接種至活化培養基中，30～37℃下培養10～20h，得到活化菌液；?

2)??將活化菌液以1%～10%的接種量接種至發酵罐中，pH值控制在5.0～7.0，溫度為30～37℃，在發酵培養基中培養12～30h得到發酵液；?

3)??將上述發酵液在20～25℃下，離心分離，得到發酵菌泥；

4)??向發酵菌泥中加入適量凍干保護劑后，進行冷凍干燥、粉碎、過篩，得到植物乳桿菌Lder01凍干粉；

5)??按每克微生態制劑中含植物乳桿菌Lder01?100～1000億CFU、纖維素酶1000～1600U、半纖維素酶200～1800U、葡萄糖0.5～0.7克、二氧化硅0.02～0.05克稱取各組分，復配得到青貯用微生態制劑成品。