[發(fā)明專利]一管式檢測突變位點的不同突變類型

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210532462.9
• 申請日: 2012-12-12
• 公開（公告）號: CN103865982A
• 公開（公告）日: 2014-06-18
• 發(fā)明（設計）人: 曲海濤;王德國;張文超
• 申請（專利權(quán)）人: 哈爾濱德歌生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/70;C12Q1/04
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.基于我公司德歌等溫擴增技術(shù)（專利申請?zhí)枺?01210474669.5）的核心反應結(jié)構(gòu)三（見說明書），實現(xiàn)一管式檢測同一突變位點的不同突變類型，將突變點設計到結(jié)構(gòu)中必要的引物片段上，同時根據(jù)結(jié)構(gòu)三的變通形式實現(xiàn)一管式檢測不同突變位點的不同突變類型。

2.根據(jù)權(quán)利1要求我們保護的是我們檢測突變的引物設計結(jié)構(gòu)（見說明書），包括在此結(jié)構(gòu)上的任何變通形式，無論在非覆蓋突變引物側(cè)加入幾個引物或加入任何引物結(jié)構(gòu)，這些都是我們專利的保護范圍，當然這些所有的結(jié)構(gòu)在我們（專利申請?zhí)枺?01210474669.5）中已經(jīng)提請保護，在此我們只是公開檢測突變的應用方法。

3.本專利的核心是覆蓋突變點的引物側(cè)所有的引物都是必要引物，而不能加入其它引物結(jié)構(gòu)，如果DNA中不存在設計突變位點的突變類型對應此種突變類型的擴增反應不會發(fā)生，只要目標DNA中只要有與設計的突變類型吻合的突變位點那么理論上將發(fā)生擴增反應，我們一管式檢測不同突變類型不是要確定其中存在哪種突變類型，而是要確定只要存在設計突變類型當中的一種，即證明一種或幾種藥耐藥。

4.針對幾個基因突變位點過近導致引物長度無法保證情況下的引物設計，覆蓋突變點的引物可以適當縮短，可以短到失去特異性，但覆蓋突變點引物設計不能短到和目標DNA反應區(qū)段其它位點堿基吻合，那么可以通過聯(lián)合保證特異性的方法，覆蓋突變的引物可以不具有特異性，非覆蓋突變點的對向引物特異性必須保證，那么非覆蓋突變點的對向引物只有聯(lián)合覆蓋突變點的引物才能發(fā)生擴增反應，因為具有特異的非覆蓋突變點引物只能和目標DNA發(fā)生擴增反應，從而保證了整個反應的特異性，也就是說如果引物設計中有一條引物失去了特異性，但聯(lián)合卻具備特異性也在本專利的保護范圍（不限于檢測基因突變）。

5.此類結(jié)構(gòu)也可以應用于其它方式的核酸擴增均在本專利保護范圍。

6.此方法主要應用于各種突變耐藥基因（如肺結(jié)核、乙肝、艾滋病等）的檢測。