[發(fā)明專利]一種提高彩色馬蹄蓮組織培養(yǎng)叢生芽增殖率的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210528074.3
• 申請日: 2012-12-11
• 公開（公告）號: CN103229717A
• 公開（公告）日: 2013-08-07
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 鄭玉紅;陸波;束曉春;王忠;彭峰
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇省中國科學(xué)院植物研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G31/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種提高彩色馬蹄蓮組織培養(yǎng)叢生芽增殖率的方法，其特征在于：?

A外植體消毒：選取直徑約2cm的健康的彩色馬蹄蓮小種球，用2g/L多菌靈水溶液浸泡15min后，淺埋于經(jīng)高壓滅菌處理的濕潤的細沙基質(zhì)中，在光照3000lx、12h/d、(25±1)℃的條件下進行預(yù)培養(yǎng)，令種球萌發(fā)；7～10d后，選取芽長約1cm的種球，經(jīng)表面消毒后接種。具體消毒方法為：用軟毛刷將塊莖刷洗干凈，避免損傷頂芽，削去塊莖表皮，在安利洗滌劑溶液中振蕩20min，再用2g/L多菌靈溶液浸泡1h，自來水沖洗40min，轉(zhuǎn)入超凈臺，切除塊莖表層，保留直徑約1.5cm的帶芽塊莖，75％酒精浸泡15s，無菌水沖洗1次，而后以0.2％的升汞消毒15～20min。處理完畢后，無菌水沖洗6～8次，無菌吸水紙吸干水分；?

B芽誘導(dǎo)培養(yǎng)：將消毒好的彩色馬蹄蓮種球切成直徑約1cm的帶芽小塊，接種至下列培養(yǎng)基中：MS基本培養(yǎng)基，蔗糖30g/L，生長激素0.1～0.2mg/L，細胞分裂素0.4～0.5mg/L，pH5.8；在培養(yǎng)溫度25±1℃，光照強度為1000～3000lx，光照時間為12～16h下進行光照培養(yǎng)20～30天至分化出芽；?

C?⁶⁰Coγ射線輻射處理：將繼代生長20d的叢生芽(連瓶)于?⁶⁰Coγ射線下進行40Gy，0.5h輻射照射，生長恢復(fù)10d后接種到以下培養(yǎng)基中：MS基本培養(yǎng)基，蔗糖30g/L，植物生長激素0.1～0.2mg/L，細胞分裂素0.4～0.5mg/L，pH5.8；培養(yǎng)溫度25±1℃，光照強度為2000～3000lx，光照時間為12～16h，進行光照培養(yǎng)25～30天。30d后繼續(xù)繼代培養(yǎng)，使叢生芽增殖；?

D生根培養(yǎng)：選取健壯的試管苗，經(jīng)過修剪后，接種到如下培養(yǎng)基中：MS基本培養(yǎng)基，蔗糖30g/L，植物生長激素1.0～2.0mg/L，細胞分裂素0.15～0.2mg/L，pH5.8；培養(yǎng)溫度25±1℃，光照強度為1000～3000lx，光照時間為10～16h，進行光照培養(yǎng)20～30天至成苗；?

E煉苗移栽：將組培瓶從培養(yǎng)室取出，在緩沖間將瓶蓋打開，進行有菌條件馴化3～5d；后用鑷子將組培苗從瓶中取出，用500～800倍多菌靈浸泡20min左右，洗凈后移栽到基質(zhì)(泥炭土∶珍珠巖∶沙＝2∶2∶1)中進行栽培。?

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高彩色馬蹄蓮增殖率的方法，其特征在于步驟C中所涉及到的⁶⁰Coγ射線下進行40Gy，0.5h輻射照射。?