[發明專利]一種節旋藻蛋白的分離純化方法

有效

• 申請號: 201210516806.7
• 申請日: 2012-12-05
• 公開（公告）號: CN103044520A
• 公開（公告）日: 2013-04-17
• 發明（設計）人: 劉冰;秦松;張允允;邵明飛;宋璐非;谷洋洋;朱義松
• 申請（專利權）人: 中國科學院煙臺海岸帶研究所
• 主分類號: C07K1/34
• 分類號: C07K1/34
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002
• 代理人: 周秀梅;李穎

1.一種節旋藻蛋白的分離純化方法，其特征在于：

步驟1）將藻粉在PBS中充分浸泡，混勻后常溫下避光放置24-72小時離心，收集上清液；

步驟2）將上清液經濾膜進行超濾濃縮，濃縮液中加入甲殼胺使混合液pH達到6.5-7.2，并進行攪拌；

步驟3）上述攪拌均勻的混合液離心取上清液，上清液中加入水經濾膜進行超濾濃縮，超濾置換鈉離子得到純化濃縮液；濃縮液噴霧干燥，即得藥品級節旋藻蛋白。

2.按權利要求1所述的節旋藻蛋白的分離純化方法，其特征在于：所述步驟1）按體積比1：15-30將藻粉在PBS中充分浸泡，混勻后常溫下避光放置24-72小時，再以18000-22000g離心20-30分鐘，收集上清液。

3.按權利要求1所述的節旋藻蛋白的分離純化方法，其特征在于：所述步驟2）將上清液經50KD的濾膜進行超濾濃縮，濃縮液中加入甲殼胺使混合液中甲殼胺終濃度為0.25-0.35％，并用堿調節混合液中pH達到6.5—7.2，同時進行攪拌15-30min是混合液充分混勻。

4.按權利要求3所述的節旋藻蛋白的分離純化方法，其特征在于：所述加入堿濃度在40-80g/L；堿為氫氧化鈉或氫氧化鉀。

5.按權利要求1所述的節旋藻蛋白的分離純化方法，其特征在于：所述步驟3）上述攪拌均勻的混合液離心取上清液，上清液中加入其體積2-3倍水經50KD的濾膜超濾濃縮，所得濃縮液再次加入其體積2-3倍水再次進行超濾濃縮，超濾濃縮共進行4-9次，進而充分超濾置換鈉離子得到純化濃縮液；濃縮液噴霧干燥，即得藥品級節旋藻蛋白。

6.按權利要求1或5所述的節旋藻蛋白的分離純化方法，其特征在于：所述濃縮液噴霧干燥具體為噴霧干燥的進風溫度為150-200℃，出風溫度為70-90℃。

7.按權利要求1或5所述的節旋藻蛋白的分離純化方法，其特征在于：所述藥品級節旋藻蛋白，其中藻藍蛋白的純度大于3.0，含量大于61.5％，別藻藍蛋白的含量小于3％，其它蛋白的含量小于2％。