[發(fā)明專利]一種節(jié)旋藻蛋白的分離純化方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201210516806.7 | 申請(qǐng)日: | 2012-12-05 |
| 公開(公告)號(hào): | CN103044520A | 公開(公告)日: | 2013-04-17 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 劉冰;秦松;張?jiān)试?/a>;邵明飛;宋璐非;谷洋洋;朱義松 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 中國(guó)科學(xué)院煙臺(tái)海岸帶研究所 |
| 主分類號(hào): | C07K1/34 | 分類號(hào): | C07K1/34 |
| 代理公司: | 沈陽(yáng)科苑專利商標(biāo)代理有限公司 21002 | 代理人: | 周秀梅;李穎 |
| 地址: | 264003 山*** | 國(guó)省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 節(jié)旋藻 蛋白 分離 純化 方法 | ||
1.一種節(jié)旋藻蛋白的分離純化方法,其特征在于:
步驟1)將藻粉在PBS中充分浸泡,混勻后常溫下避光放置24-72小時(shí)離心,收集上清液;
步驟2)將上清液經(jīng)濾膜進(jìn)行超濾濃縮,濃縮液中加入甲殼胺使混合液pH達(dá)到6.5-7.2,并進(jìn)行攪拌;
步驟3)上述攪拌均勻的混合液離心取上清液,上清液中加入水經(jīng)濾膜進(jìn)行超濾濃縮,超濾置換鈉離子得到純化濃縮液;濃縮液噴霧干燥,即得藥品級(jí)節(jié)旋藻蛋白。
2.按權(quán)利要求1所述的節(jié)旋藻蛋白的分離純化方法,其特征在于:所述步驟1)按體積比1:15-30將藻粉在PBS中充分浸泡,混勻后常溫下避光放置24-72小時(shí),再以18000-22000g離心20-30分鐘,收集上清液。
3.按權(quán)利要求1所述的節(jié)旋藻蛋白的分離純化方法,其特征在于:所述步驟2)將上清液經(jīng)50KD的濾膜進(jìn)行超濾濃縮,濃縮液中加入甲殼胺使混合液中甲殼胺終濃度為0.25-0.35%,并用堿調(diào)節(jié)混合液中pH達(dá)到6.5—7.2,同時(shí)進(jìn)行攪拌15-30min是混合液充分混勻。
4.按權(quán)利要求3所述的節(jié)旋藻蛋白的分離純化方法,其特征在于:所述加入堿濃度在40-80g/L;堿為氫氧化鈉或氫氧化鉀。
5.按權(quán)利要求1所述的節(jié)旋藻蛋白的分離純化方法,其特征在于:所述步驟3)上述攪拌均勻的混合液離心取上清液,上清液中加入其體積2-3倍水經(jīng)50KD的濾膜超濾濃縮,所得濃縮液再次加入其體積2-3倍水再次進(jìn)行超濾濃縮,超濾濃縮共進(jìn)行4-9次,進(jìn)而充分超濾置換鈉離子得到純化濃縮液;濃縮液噴霧干燥,即得藥品級(jí)節(jié)旋藻蛋白。
6.按權(quán)利要求1或5所述的節(jié)旋藻蛋白的分離純化方法,其特征在于:所述濃縮液噴霧干燥具體為噴霧干燥的進(jìn)風(fēng)溫度為150-200℃,出風(fēng)溫度為70-90℃。
7.按權(quán)利要求1或5所述的節(jié)旋藻蛋白的分離純化方法,其特征在于:所述藥品級(jí)節(jié)旋藻蛋白,其中藻藍(lán)蛋白的純度大于3.0,含量大于61.5%,別藻藍(lán)蛋白的含量小于3%,其它蛋白的含量小于2%。
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