[發明專利]低密度脂蛋白中膽固醇的多重定量方法

有效

• 申請號: 201210513016.3
• 申請日: 2005-03-30
• 公開（公告）號: CN103122372A
• 公開（公告）日: 2013-05-29
• 發明（設計）人: 松本京子;松井寬史
• 申請（專利權）人: 電化生研株式會社
• 主分類號: C12Q1/60
• 分類號: C12Q1/60;C12Q1/44;C12Q1/28;C12Q1/26
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 郭文潔;權陸軍

1.一種用單次測量定量生物樣品中的低密度脂蛋白中的膽固醇和總膽固醇的方法，包括：

處理生物樣品中除低密度脂蛋白外的脂蛋白以產生過氧化氫的第一步；和

轉化第一步中所獲得的過氧化氫為醌染料并處理殘留的低密度脂蛋白以及轉化所產生的過氧化氫為醌染料的第二步，

其中所述醌染料并不在第一步形成，并單次測量根據第二步中形成的醌染料的量由此定量低密度脂蛋白中的膽固醇和總膽固醇。

2.根據權利要求1的方法，其中與醌染料形成相關的試劑組合物包括4-氨基安替比林、酚類或苯胺類氫供體化合物以及過氧化物酶；在第一步中添加4-氨基安替比林、酚類或苯胺類氫供體化合物中的任何一種；在第一步中沒有添加的試劑組合物在第二步中添加。

3.根據權利要求1或2的方法，其中在第一步中，在作用于除低密度脂蛋白外的脂蛋白的表面活性劑存在下使膽固醇酯酶和膽固醇氧化酶作用于生物樣品中除低密度脂蛋白外的脂蛋白以產生過氧化氫；并在第二步中，在至少作用于低密度脂蛋白的表面活性劑存在下使膽固醇酯酶和膽固醇氧化酶作用于生物樣品中所含的低密度脂蛋白以產生過氧化氫。

4.根據權利要求1-3任一的方法，其中在第二步中，第一步獲得的過氧化氫被轉化為醌染料；將至少作用于低密度脂蛋白的表面活性劑添加到測量系統中；使膽固醇酯酶和膽固醇氧化酶作用于測量系統中殘留的低密度脂蛋白；并通過轉化為醌染料測量所產生的過氧化氫。

5.根據權利要求1-4任一的方法，其中基于下述的兩個值同時測量生物樣品中的低密度脂蛋白中的膽固醇和總膽固醇的存在量，所述的兩個值為反映總膽固醇存在量的第二步中總吸光度改變量的測量值，以及反映低密度脂蛋白中的膽固醇存在量的相對于第二步中所產生的過氧化氫量的吸光度改變量的測量值。

6.根據權利要求1-5任一的方法，其中第二步中吸光度的改變顯示了兩相性的增加，其中在添加第二試劑后的快速增加和隨后的緩速增加；根據后面吸光度的緩速改變量定量低密度脂蛋白中膽固醇。

7.根據權利要求1-6任一的方法，其中根據第二步中吸光度總的改變量定量總膽固醇。

8.根據權利要求1-7任一的方法，其中在不同的測量條件下，使用供臨床化學檢驗用的自動分析儀單次測量來進行分析。

9.一種穩定根據權利要求1-8任一的方法中所用液體試劑的方法，其中：

在第一步中添加的第一試劑中包含作為與醌染料形成相關的試劑組合物的4-氨基安替比林、酚類或苯胺類氫供體化合物的任意一種；和

在第二試劑中含有4-氨基安替比林、酚類或苯胺類氫供體化合物以及過氧化酶之中未包含在第一試劑中的試劑組合物。

10.根據權利要求9的方法，其中在第一試劑中還含有作用于除低密度脂蛋白外的脂蛋白的表面活性劑、膽固醇酯酶和膽固醇氧化酶；以及在第二試劑中含有至少作用于低密度脂蛋白的表面活性劑。