[發(fā)明專利]一種獲得巴戟天體細胞再生植株的方法及其培養(yǎng)基

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210510932.1
• 申請日: 2012-12-03
• 公開（公告）號: CN102960251A
• 公開（公告）日: 2013-03-13
• 發(fā)明（設計）人: 秦垂新;羅江清;姚松君;郭愛玲;鄭志娟;梁展;陳偉文;孫君社;鄭志安;張秀清
• 申請（專利權(quán)）人: 無限極（中國）有限公司;高要市董福行農(nóng)副產(chǎn)品種植管理有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京紀凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢;任鳳華

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種獲得巴戟天體細胞再生植株的方法及其培養(yǎng)基。

背景技術(shù)

巴戟天（Morinda?officinalis?How.）是茜草科多年生木質(zhì)藤本植物，肉質(zhì)根入藥，根皮含蒽醌化合物，環(huán)烯醚萜甙、植物甾醇及多糖、低聚糖等藥用成分。具有補腎壯陽、強筋骨、祛風濕等功效，用途十分廣泛，是目前我國出口創(chuàng)匯和內(nèi)需的主要中藥品之一，加上近年來巴戟天的市場需求量大，以至巴戟天的栽培規(guī)模不斷擴大，由于巴戟天種植是剪取自身藤條作為種苗，對于大規(guī)模種植時所需種苗產(chǎn)生了瓶頸制約，本技術(shù)是利用植物細胞的全能性進行苗木培育：植物體的每一個細胞都攜帶著一套完整的基因組，并具有發(fā)育為完整植株的潛能，因為每個細胞都是來自于受精卵，所以有與受精卵具有相同的遺傳物質(zhì)。基于植物此特點，有必要對巴戟天進行組培快繁研究，為種植戶提供優(yōu)質(zhì)、大量巴戟天種苗，切實解決巴戟天苗木需求的瓶頸，提高巴戟天種植產(chǎn)量。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的一個目的是提供一種用于獲得巴戟天（Morinda?officinalis?How.）體細胞再生植株的成套培養(yǎng)基，它含有獨立包裝的培養(yǎng)基A（即誘導培養(yǎng)基），所述培養(yǎng)基A為由MS基本培養(yǎng)基、細胞分裂素、生長素、蔗糖或葡萄糖、和凝固劑制成的固體培養(yǎng)基；

所述培養(yǎng)基A中的所述細胞分裂素的含量為0.1mg/L；

所述培養(yǎng)基A中的所述生長素的含量為0.1mg/L。

在上述成套培養(yǎng)基中，所述培養(yǎng)基A中的所述細胞分裂素為6-BA或KT；

和/或，所述培養(yǎng)基A中的所述生長素為2,4-D或NAA；

和/或，所述培養(yǎng)基A中的所述蔗糖或葡萄糖的含量為20g/L；

和/或，所述培養(yǎng)基A中的所述凝固劑為瓊脂，所述瓊脂在所述培養(yǎng)基A中的含量為7—8g/L。

在上述成套培養(yǎng)基中，還可含有獨立包裝的培養(yǎng)基B（即增殖培養(yǎng)基），所述培養(yǎng)基B為由MS基本培養(yǎng)基、細胞分裂素、生長素、蔗糖和凝固劑制成的固體培養(yǎng)基；

所述培養(yǎng)基B中的所述細胞分裂素的含量為1.0—2.0mg/L；

所述培養(yǎng)基B中的所述生長素的含量為0.5mg/L。

在上述成套培養(yǎng)基中，所述培養(yǎng)基B中的所述細胞分裂素為6-BA；

和/或，所述培養(yǎng)基B中的所述生長素為2,4-D或NAA；

和/或，所述培養(yǎng)基B中的所述蔗糖的含量為20g/L；

和/或，所述培養(yǎng)基B中的所述凝固劑為瓊脂，所述瓊脂在所述培養(yǎng)基B中的含量為7—8g/L。

在上述成套培養(yǎng)基中，還可含有獨立包裝的培養(yǎng)基C（即生根培養(yǎng)基），所述培養(yǎng)基C為由1/2—1/8的MS基本培養(yǎng)基、NAA和凝固劑制成的固體培養(yǎng)基；

所述培養(yǎng)基C中的所述NAA的含量為0.01—0.1mg/L，如0.01mg/L、0.05mg/L或0.1mg/L；

所述培養(yǎng)基C中的所述凝固劑具體為瓊脂，所述瓊脂在所述培養(yǎng)基C中的含量為4—6g/L。

本發(fā)明的另一個目的是提供一種獲得巴戟天（Morinda?officinalis?How.）體細胞再生植株的方法，所述方法包括將所述巴戟天的帶節(jié)莖段用所述培養(yǎng)基A進行誘導培養(yǎng)獲得巴戟天不定芽的步驟。

所述方法還可包括將所述巴戟天不定芽用所述培養(yǎng)基B進行擴繁培養(yǎng)以獲得更多不定芽的步驟。

所述方法還可包括將所述巴戟天不定芽用所述培養(yǎng)基C進行生根培養(yǎng)的步驟。

在上述方法中，所述將所述巴戟天的帶節(jié)莖段用所述培養(yǎng)基A進行誘導培養(yǎng)前，包括將所述巴戟天的帶節(jié)莖段按照包括如下步驟1）-2）的方法進行消毒的步驟：

1）用體積百分含量為75%的乙醇溶液浸泡30秒；

2）用有效氯質(zhì)量百分含量為10%的次氯酸鈉溶液浸泡20分鐘。

在上述方法中，所述誘導培養(yǎng)的光照條件為先黑暗培養(yǎng)7天再按照如下光照條件培養(yǎng)：每天24小時中光照12小時，光照的強度為1000—3000lux，其余時間為黑暗；所述誘導培養(yǎng)的溫度為26℃—28℃；

和/或，所述擴繁培養(yǎng)的光照條件為先在每天24小時中光照12小時、光照強度為2000lux、其余時間為黑暗的條件下培養(yǎng)7天，再移至每天24小時中光照12小時，光照強度為1000—1500Lux，其余時間為黑暗的條件下培養(yǎng)；所述擴繁培養(yǎng)的溫度為26℃—28℃；