[發明專利]一株槭射脈革菌菌株及其在甲霜靈農藥殘留降解中的應用

有效

• 申請號: 201210506098.9
• 申請日: 2012-11-30
• 公開（公告）號: CN103122316A
• 公開（公告）日: 2013-05-29
• 發明（設計）人: 袁海生;戴玉成;魏玉蓮
• 申請（專利權）人: 中國科學院沈陽應用生態研究所
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C02F3/34;A62D3/02;C12R1/645;C02F101/38;A62D101/04;A62D101/28
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002
• 代理人: 馬馳

1.一株槭射脈革菌菌株，其特征在于：該菌株命名為槭射脈革菌（Phlebia?acerina）保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏日期是2012年11月15日保藏編號為：CGMCC6809。?

2.按權利要求1所述的槭射脈革菌菌株，其特征在于：菌落為棉絮狀，乳白色；菌落由生殖菌絲組成，生殖菌絲薄壁到稍厚壁，直徑1.8-6微米，多簡單分隔，常分枝，菌絲內容物在棉蘭試劑中有嗜藍反應，在碘化鉀試劑中無變化；平皿培養3天菌落直徑4厘米；該菌株的ITS?rDNA序列已經提交到GenBank數據庫（GenBank登錄號：KC218570），發現該序列與Phlebia?acerina菌株BMC3014的基因序列同源性達99%。?

3.一種權利要求1或2所述的槭射脈革菌菌株在降解甲霜靈農藥殘留的應用。?

4.按權利要求3所述的槭射脈革菌菌株在降解甲霜靈農藥殘留的應用，其特征在于：?

所述槭射脈革菌菌株的培養過程為：將所述的槭射脈革菌菌株Phlebia?acerina?Y3667菌絲體接種到直徑60毫米平皿培養基上，在28-30℃，平皿培養基上生長3-5天；解剖刀刮取菌絲，接入液體培養基中，2個培養皿刮取的菌絲接種到100ml培養液中，于28-30℃，140rmp/min轉速條件下振蕩培養3-5天，獲得包含其分泌的胞外降解酶的培養液，其為菌絲及菌液的混合菌劑；?

所述的平皿培養基組成為麥芽浸粉10g，瓊脂18g，加水至1L，pH自然；?

所述的液體培養基組成為麥芽浸粉10g，磷酸二氫鉀0.5g,CuSO₄0.1g,CaCl₂0.01g,MnSO₄0.01g，pH自然，加水定容至1L。?

5.按權利要求3或4所述的槭射脈革菌菌株在降解甲霜靈農藥殘留的應用，其特征在于：?

在經過權利要求4培養的培養液100ml中，加入最終濃度5-10mg/L的甲霜靈農藥，于30℃，轉速140rmp/min，搖床震蕩培養，培養時間48小時以上。?

6.按權利要求5所述的槭射脈革菌菌株在降解甲霜靈農藥殘留的應用，其特征在于：?

所述應用按如下步驟進行：?

（1）在經過權利要求3培養的培養液100-150ml中，加入終濃度5-10mg/L的甲霜靈農藥，于28-30℃，轉速140-160rmp/min，搖床震蕩培養，以未經接種的培養液中加入相等濃度的甲霜靈農藥作為對照組；?

（2）每隔12h取樣一次，取2-3ml樣品置于50mL塑料離心管中，加入乙腈10-12mL，振蕩20-30min，離心，取出上清液，重復3次，合并上清液，提取培養液中的甲霜靈農藥殘留，經佛羅里硅土固相萃取柱凈化，在38-40℃下旋轉蒸發儀濃縮，-20℃下冷凍干燥，再用少量乙腈溶解，進行氣相色譜分析,計算降解率。?

7.按權利要求5所述的槭射脈革菌菌株在降解甲霜靈農藥殘留的應用，其特征在于：其降解率（%）=（A-B）/A×100，?

其中A為對照組甲霜靈農藥殘留值，?

B為經降解菌劑降解后的甲霜靈農藥殘留值。?

8.按權利要求3或4所述的槭射脈革菌菌株在降解甲霜靈農藥殘留的應用，其特征在于：以槭射脈革菌為菌種，以殺菌劑為補充碳源，降解甲霜靈。?