[發明專利]胃黏膜樣品中幽門螺旋桿菌的化學發光免疫測定法

無效

• 申請號: 201210498364.8
• 申請日: 2012-11-29
• 公開（公告）號: CN102980884A
• 公開（公告）日: 2013-03-20
• 發明（設計）人: 奚偉紅;王布強;王京;高淑舫;朱丹丹
• 申請（專利權）人: 江蘇創生生物技術有限公司
• 主分類號: G01N21/76
• 分類號: G01N21/76;G01N33/569
• 代理公司: 江陰市同盛專利事務所 32210
• 代理人: 唐紉蘭;曾丹

1.一種胃黏膜樣品中幽門螺旋桿菌的化學發光免疫測定法包括以下步驟：

（a）制作帶檢測物質的樣品稀釋液

將含有幽門螺旋桿菌的一種胃黏膜樣品懸浮于樣品稀釋液；

（b）?抗體-抗原復合體的形成

把樣品稀釋液中的胃黏膜樣品與抗幽門螺旋桿菌抗原的第一種多克隆抗體接觸以形成抗體-抗原復合體；

（c）把步驟（b）的樣品和步驟（b）所得到的抗體-抗原復合體進行分離；

（d）抗體-抗原-抗體復合體的形成

把步驟（c）得到的分離后的抗體-抗原復合體暴露于抗幽門螺旋桿菌抗原的第二種多克隆抗體，并把抗幽門螺旋桿菌抗原的第二種多克隆抗體的一部分與復合體反應，?其中所述的第一種多克隆抗體和第二種多克隆抗體中的其中一種多克隆抗體結合在一種固體載體上，而另一種多克隆抗體用一種檢測劑進行標記；

（e）發光底物的添加

在含有抗體-抗原-抗體復合體的固體載體中添加發光底物；

（f）測定發光底物產生的光信號的量

其特征是：所述樣品稀釋液含有蛋白質和堿性物質，樣品稀釋液的pH在8.0~10之間。

2.根據權利要求1所述的一種胃黏膜樣品中幽門螺旋桿菌的化學發光免疫測定法，其特征是：所述步驟（a）中樣品稀釋液中的蛋白質為選自胎（小）牛血清、正常山羊血清、豚鼠血清、馬血清、酪蛋白、白蛋白、明膠和牛血清白蛋白中的一種。

3.根據權利要求1所述的一種胃黏膜樣品中幽門螺旋桿菌的化學發光免疫測定法，其特征是：所述步驟（a）樣品稀釋液中的堿性物質包含但不限于三羥甲基甲胺基丙磺酸、N，N-雙(2-羥乙基)甘氨酸、三羥甲基氨基甲烷、N-三-(羥甲基)甲基氨基乙酸、?4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙烷磺酸半鈉鹽、N-三(羥甲基)甲基-2-氨基乙磺酸、3-（N-嗎非啉）乙磺酸、四硼酸鈉緩沖液、碳酸鈉-碳酸氫鈉緩沖液、甘氨酸緩沖液中的一種或多種組合，其中堿性物質為pH大于8的緩沖液。

4.根據權利要求1或2或3所述的一種胃黏膜樣品中幽門螺旋桿菌的化學發光免疫測定法，其特征是：所述步驟（a）樣品稀釋液中還設有胃蛋白酶抑制劑。

5.根據權利要求4所述的一種胃黏膜樣品中幽門螺旋桿菌的化學發光免疫測定法，其特征是：所述胃蛋白酶抑制劑包含但不限于抑肽素、硫柳汞中的一種。

6.根據權利要求1或2或3所述的一種胃黏膜樣品中幽門螺旋桿菌的化學發光免疫測定法，其特征是：其中步驟（d）中固體載體為酶標反應板或纖維素膜。

7.根據權利要求1或2或3所述的一種胃黏膜樣品中幽門螺旋桿菌的化學發光免疫測定法，其特征是：其中步驟（d）中檢測劑選自辣根過氧化物酶。

8.根據權利要求4所述的一種胃黏膜樣品中幽門螺旋桿菌的化學發光免疫測定法，其特征是：其中步驟（d）中檢測劑選自辣根過氧化物酶。

9.根據權利要求1或2或3所述的一種胃黏膜樣品中幽門螺旋桿菌的化學發光免疫測定法，其特征是：所述步驟（e）中發光底物為魯米諾（Luminol）底物，魯米諾（Luminol）底物含有魯米諾、過氧化氫和復合型增強劑。

10.根據權利要求9所述的一種胃黏膜樣品中幽門螺旋桿菌的化學發光免疫測定法，其特征是：所述復合型增強劑為對碘苯酚。