[發明專利]一種分步酶解提取滸苔多糖的方法

無效

• 申請號: 201210486512.4
• 申請日: 2012-11-13
• 公開（公告）號: CN103804503A
• 公開（公告）日: 2014-05-21
• 發明（設計）人: 唐志紅;鞠寶;任育紅;呂家森;溫少紅
• 申請（專利權）人: 煙臺大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61P39/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種滸苔多糖的提取方法，尤其是涉及一種分步酶解提取滸苔多糖的方法。

背景技術

滸苔(Enteromorpha)是一種大型綠藻，俗稱苔條、青海苔等，為綠藻門石莼目石莼科滸苔屬的藻類植物，生長在潮間帶。在中國，滸苔產量很高，尤其是東部沿海。近年來，滸苔的快速繁殖對我國沿海造成污染，為治理滸苔過度繁殖造成的污染，需要耗費大量的人力物力，因此如能對滸苔進行開發利用，不但可治理滸苔污染，同時還能夠變廢為寶。

自古以來滸苔即為食用和藥用藻類，在《本草綱目》中記載滸苔可“燒末吹鼻止衄血；湯浸搗敷手背腫痛”；《隱身居飲食譜》記載：“清膽，消瘰疬癭瘤，瀉脹、化痰，治水土不服。滸苔富含糖類、蛋白質、粗纖維及礦物質，同時還含有脂肪和維生素。近年來的研究證實，滸苔的主要成分水溶性多糖是藥理活性很強的成分，具有顯著的降血脂、抗疲勞、抗菌、抗腫瘤及增強免疫力等多種生物學活性(林文庭.淺談滸苔的開發與利用.中國食物與營養，2007，9：23～25)

目前滸苔多糖的提取最常用的是熱水浸提法(呂玲玲.滸苔水溶性多糖提取工藝的優化研究.安徽農業科學，2009，37(24)：717，756.)，如申請號為201010224578.7的專利申請所述。但是采用熱水浸提法從滸苔中提取多糖的收率較低、雜質含量高，耗能高，活性低。

發明內容

本發明就是針對上述問題，提供了一種產率高、產品純度高、耗能低、無污染且保留較高生物學活性的滸苔多糖的提取方法。

本發明技術方案所采用的生產工藝過程為：滸苔藻體的除雜、干燥、粉碎——分步酶解——酶的滅活——離心、濃縮、乙醇沉淀——真空干燥。

具體步驟如下：

步驟1：將滸苔清洗干凈，60～80℃烘干后粉碎、過篩(20～60目)。稱取所得滸苔粉末，按料液比1∶20～60(w/v，g/ml)加入蒸餾水，充分攪拌，浸泡10～15h，得滸苔第一浸提液。

步驟2：向所述滸苔第一浸提液加入酸調節pH值為3.5～4.5，將溫度加熱至40～50℃，加入果膠酶，充分攪拌，酶解1～2h，得滸苔第二浸提液。

步驟3：向所述滸苔第二浸提液加入堿調節pH值為4.5～5.5，將溫度加熱至50～60℃，加入纖維素酶，充分攪拌，酶解2～4h，得滸苔第三浸提液。

步驟4：向所述滸苔第三浸提液中加入木瓜蛋白酶，在溫度50～60℃、pH值為5.0～6.0條件下酶解1～2h，得滸苔第四浸提液。

步驟5：將上述完成分步酶解后得到的產物加熱至90～100℃，對殘留酶進行滅活，充分攪拌浸泡，處理20～50min，得滸苔第五浸提液。

步驟6：將滸苔第五浸提液在10000rpm離心10～15min，上清液過濾后真空濃縮；向濃縮物中加入乙醇，離心沉淀，沉淀物真空干燥，得到滸苔多糖。

本發明的有益效果：

本發明采用分步酶解法提取滸苔多糖，在多糖浸提過程中分步加入果膠酶、纖維素酶和木瓜蛋白酶，使其分別在各自酶活力最高的操作環境下處理滸苔浸提液。果膠酶、纖維素酶可水解果膠質和纖維素，有效的溶解細胞壁，使多糖更容易從細胞內釋放出來；木瓜蛋白酶不僅能破壞游離的蛋白質，而且能使多糖結合的蛋白質降解，從而使得多糖更充分溶入水中，因此多糖的提取效率和純度大大提高，并且保留了較高的生物活性。

利用本發明的提取方法所得成品色澤灰白，多糖得率15.92±1.46％，多糖含量為68.35±4.46％。方法穩定、可靠。體外抗氧化實驗證實，所制備的滸苔多糖對超氧陰離子自由基的清除能力為73.1％～83.7％，清除能力和V_C相當，且具有劑量效應，說明其具備較強的體外抗氧化活性。

本發明的整個工藝過程中無污染物排放，適合于大規模生產，有益于滸苔資源的開發利用。

具體實施方式

實施例1

步驟1：將滸苔清洗干凈，60℃烘干后粉碎、過40目篩。稱取1kg滸苔粉末，加入20L蒸餾水，充分攪拌，浸泡15h。得滸苔第一浸提液。

步驟2：向所述滸苔第一浸提液加入檸檬酸調節pH值為4.0，將溫度加熱至45℃，加入15g果膠酶，充分攪拌，酶解1h，得滸苔第二浸提液。

步驟3：向所述滸苔第二浸提液加入0.1M氫氧化鈉調節pH值為5.0，將溫度加熱至55℃，加入10g纖維素酶，充分攪拌，酶解2h，得滸苔第三浸提液。